本文選題：黏菌素 + 坐骨神經(jīng)�。� 參考：《東北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：近年來,由于抗生素的濫用,細(xì)菌多重耐藥性瘋狂蔓延,尤其是多重耐藥革蘭氏陰性“超級細(xì)菌”肆虐全世界多個國家。然而,應(yīng)對多重耐藥性細(xì)菌的新藥研發(fā)進展緩慢,而黏菌素(colistin)對多重耐藥革蘭氏陰性桿菌療效顯著,使其又重新得到重視和應(yīng)用。但因神經(jīng)毒性和腎毒性問題仍然存在,所以探尋和發(fā)現(xiàn)降低或者消除黏菌素毒性的措施對指導(dǎo)其臨床用藥具有重要意義。自噬又稱為細(xì)胞的自我吞噬,涉及蛋白和細(xì)胞器的降解,廣泛參與動物體內(nèi)多種正常生理和病理過程,并且在維持細(xì)胞自我穩(wěn)態(tài)和促進細(xì)胞生存等方面起重要作用。自噬體的功能與癌癥、神經(jīng)退行性疾病和微生物感染相關(guān)。前期體外試驗已經(jīng)證明,黏菌素能夠誘導(dǎo)PC12細(xì)胞產(chǎn)生自噬,并且自噬可降低黏菌素的神經(jīng)毒性而起到保護細(xì)胞的作用。由于神經(jīng)系統(tǒng)的復(fù)雜性,體內(nèi)試驗更具有說服力。本試驗選取昆明系雌性小鼠,20~24 g,分為5組(正常對照組及4個給藥組),每組10只。給藥組每天尾靜脈注射15 mg/kg硫酸黏菌素,分別連續(xù)注射1、3、5和7 d后,通過測量體重變化,觀察坐骨神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化,以及利用Western Blot法檢測自噬相關(guān)蛋白LC3 I/II和p62的表達,確定小鼠給藥后坐骨神經(jīng)產(chǎn)生明顯自噬作用的給藥時間為連續(xù)給藥3 d;在此基礎(chǔ)上,設(shè)立正常對照組、自噬抑制劑(3-MA)組(600 mg/kg 3-MA)、硫酸黏菌素(colistin)組(15 mg/kg硫酸黏菌素)和colistin+3-MA組(15 mg/kg硫酸黏菌素+600 mg/kg 3-MA),連續(xù)給藥3 d,進行體重測量、神經(jīng)行為學(xué)組合測試(自發(fā)活動能力、步態(tài)評分和后肢支撐力測試)、神經(jīng)氧化-抗氧化系統(tǒng)指標(biāo)測定、神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)觀察和Western Blot檢測。結(jié)果表明:(1)在硫酸黏菌素誘導(dǎo)小鼠坐骨神經(jīng)毒性過程中,電鏡觀察到自噬體數(shù)量增加,Western Blot法檢測到自噬相關(guān)蛋白LC3 II/LC3 I比值升高,p62表達降低,與正常對照組比較,均在給藥1 d后出現(xiàn)顯著性差異(p0.05),給藥3 d后出現(xiàn)極顯著差異(p0.01)。故選擇15 mg/kg硫酸黏菌素劑量,連續(xù)給藥3 d作為本試驗用藥劑量和給藥時間。(2)在硫酸黏菌素誘導(dǎo)小鼠坐骨神經(jīng)自噬作用的研究中,與正常對照組相比,colistin組出現(xiàn)自噬體,且LC3 II/LC3 I比值升高,p62表達降低,出現(xiàn)極顯著差異(p0.01),3-MA組和colistin+3-MA組無明顯差異(p0.05);與colistin組相比,colistin+3-MA組LC3 II/LC3 I的比值降低,p62表達增加,且差異極顯著(p0.01),說明3-MA抑制坐骨神經(jīng)自噬,證明colistin可誘導(dǎo)坐骨神經(jīng)產(chǎn)生自噬。(3)在神經(jīng)行為學(xué)組合測試中,與正常對照組相比,3-MA組或colistin組小鼠神經(jīng)行為未見明顯差異(p0.05),說明colistin給藥3 d時小鼠可因坐骨神經(jīng)的自噬作用尚未表現(xiàn)出明顯的外周神經(jīng)異�，F(xiàn)象;但colistin+3-MA組小鼠出現(xiàn)自發(fā)活動能力降低(p0.05),步態(tài)評分升高(p0.01),后肢支撐力下降(p0.05),揭示硫酸黏菌素誘導(dǎo)的自噬對其神經(jīng)毒性初期具有保護作用。(4)在神經(jīng)氧化-抗氧化系統(tǒng)試驗中,與正常對照組相比,3-MA或colistin組坐骨神經(jīng)抗氧化功能相關(guān)指標(biāo)未見明顯差異;而colistin+3-MA組MDA升高(p0.05),CAT降低(p0.05),SOD和GSH均降低(p0.01),表明抑制自噬會加快神經(jīng)系統(tǒng)的氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡過程,提示黏菌素誘導(dǎo)小鼠坐骨神經(jīng)自噬的保護作用可能與氧化應(yīng)激有關(guān)。綜上所述,硫酸黏菌素誘導(dǎo)小鼠坐骨神經(jīng)產(chǎn)生的自噬對其神經(jīng)具有保護作用,其作用機制可能與氧化應(yīng)激有關(guān)。
[Abstract]:In recent years , due to the abuse of antibiotics , the spread of multidrug resistance of bacteria , especially the multiple drug - resistant gram - negative " super - bacteria " , has played an important role in the treatment of multiple drug - resistant Gram - negative bacteria . There was no significant difference in the expression of LC3 II / LC3 I in the mouse sciatic nerve than in the normal control group ( p < 0.05 ) . ( 4 ) In the experiment of nerve oxidation and anti - oxidation system , there was no significant difference in the anti - oxidation function of sciatic nerve in 3 - MA or colistin group compared with normal control group .

【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S859.7

【參考文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 代重山;黏菌素神經(jīng)毒性小鼠模型建立、機制探討及NGF保護作用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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本文編號：1865776