本文選題：延邊黃牛 + 膽綠素還原酶��； 參考：《中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年05期

【摘要】：為了克隆延邊黃牛膽綠素還原酶(Biliverdin reductase,BVR)的CDNA序列后在大腸桿菌中表達(dá)、純化并進(jìn)行鑒定。本試驗(yàn)根據(jù)黃牛、馬和東北虎BVR基因的cDNA序列設(shè)計(jì)引物,通過3′和5′RACE方法獲得延邊黃牛BVR基因全長cDNA序列。之后構(gòu)建pET-28a-BVR重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化到E.coli BL21(DE3)中表達(dá)并進(jìn)行純化。通過分光光度法檢測BVR酶的活性。結(jié)果顯示,所獲得的延邊黃牛BVR基因cDNA含有1個(gè)完整的開放閱讀框,該cDNA序列閱讀框由891個(gè)核苷酸組成,編碼296個(gè)氨基酸。用BLAST和ClustalW軟件進(jìn)行同源性分析,與牛、馬和東北虎的核苷酸相似性分別為98.0%,88.0%和87.0%。SDS-PAGE鑒定其相對分子質(zhì)量為32 560。分光光度法檢測BVR具有催化膽綠素還原為膽紅素的活性。結(jié)果表明,通過克隆表達(dá)獲得了有活性的延邊黃牛BVR酶蛋白,為膽紅素的進(jìn)一步大量制備提供理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to clone the CDNA sequence of Biliverreductin reductase (Biliverreductase BVR) from Yanbian cattle, it was expressed in Escherichia coli, purified and identified. Primers were designed according to the cDNA sequence of BVR gene of yellow cattle, horse and Siberian tiger, and the full-length cDNA sequence of BVR gene of Yanbian cattle was obtained by 3 'and 5'RACE methods. PET-28a-BVR recombinant plasmid was then constructed and transformed into E.coli BL21 (DE3) for expression and purification. The activity of BVR enzyme was detected by spectrophotometry. The results showed that the BVR gene cDNA of Yanbian cattle contained a complete open reading frame, which consisted of 891 nucleotides and encoded 296 amino acids. The nucleotide similarity with cattle, horse and Amur tiger was 98.0% and 88.0%, respectively, and the relative molecular weight of Amur tiger was 32560 by using BLAST and ClustalW software. BVR has catalytic activity of reducing bilirubin to bilirubin by spectrophotometry. The results showed that the active BVR protein of Yanbian cattle was obtained by cloning and expression, which provided a theoretical basis for the further preparation of bilirubin.
【作者單位】： 延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31160501)
【分類號】：S823.81

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 童曉濱;陳良璧;;提取膽紅素工藝方法的改進(jìn)及其機(jī)理探討[J];天水師范學(xué)院學(xué)報(bào);2006年02期

2 吉清,何鳳田;包涵體復(fù)性的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊;2004年06期

3 呂昌蓮,孫建平,劉明,王秀宏,周虹;大鼠腎膽綠素還原酶cDNA克隆、表達(dá)及鑒定[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2004年01期

4 王洪存;孫樹英;;膽紅素工藝改進(jìn)及質(zhì)量檢測[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;1991年06期

5 鄭連爽;;膽紅素生理功能的新見解[J];生命的化學(xué)(中國生物化學(xué)會通訊);1990年03期

6 劉曉凱,廖劍波,賀春美,馮文莉;對膽紅素三種提取方法的考察比較[J];沈陽藥學(xué)院學(xué)報(bào);1990年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 章鶴;鴨HO和BVR基因片段的克隆及mRNA表達(dá)量的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張俊平;周宗清;蔣鳳英;趙本進(jìn);楊惠萍;倪建平;;鴿Ⅰ型副黏病毒(S-1株)滅活疫苗免疫劑量研究[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2017年05期

2 張俊平;張佩華;周宗清;蔣鳳英;趙本進(jìn);楊惠萍;倪建平;;鴿Ⅰ型副黏病毒(S-1株)滅活疫苗基礎(chǔ)種子代次鑒定試驗(yàn)初報(bào)[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2017年02期

3 張俊平;蔣鳳英;楊惠萍;李春華;倪建平;趙本進(jìn);何錫忠;;鴿副黏病毒Ⅰ型(川沙株)純化及其檢驗(yàn)[J];上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2016年01期

4 王林;韋海濤;宋彥軍;周德剛;梅力;李剛;雷琪莉;馮小宇;;鴿新城疫病毒北京分離株F基因的遺傳進(jìn)化分析[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年02期

5 隋修錕;李剛;李鐵;吳迪;程朝飛;陶春愛;黃華欣;;四株鴿Ⅰ型副黏病毒的分離鑒定及基因型分析[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2013年02期

6 朱杰;趙晴晴;陳廣仁;宋慶慶;胡順林;王曉泉;李群輝;劉秀梵;;免疫鴿群中2株新城疫病毒的分離鑒定及遺傳進(jìn)化分析[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2012年10期

7 葉賀佳;仇微紅;李敏;梁昭平;王鑫;羅開健;;鴿新城疫滅活疫苗的研制及免疫效果研究[J];中國家禽;2012年16期

8 范建華;劉華雷;劉學(xué)賢;徐步;;一株鴿新城疫病毒的分離鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2011年06期

9 李春華;楊惠萍;謝巧;蔣鳳英;王英;;鴿副黏病毒Ⅰ型S-1株的分子特性分析[J];江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2010年06期

10 羅鋒;招麗嬋;畢英佐;;鴿瘟的流行動態(tài)及其有效防治[J];養(yǎng)禽與禽病防治;2010年06期

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 薛劍鋒;徐小春;張振偉;閻宏;;能量水平與精粗比對中衛(wèi)山羊羯羔羊日糧消化性能的影響[J];飼料工業(yè);2011年13期

2 鄒彩霞;楊炳壯;韋升菊;梁賢威;李舒露;覃廣勝;李麗莉;;泌乳前期水牛能量代謝及其需要量初探[J];動物營養(yǎng)學(xué)報(bào);2011年06期

3 賈弟林;李文波;劉占發(fā);張兵;;日糧營養(yǎng)水平對中衛(wèi)山羊母羊泌乳性能的影響[J];中國草食動物;2011年02期

4 孫建全;趙紅波;劉春林;游偉;王星凌;;改變?nèi)占Z蛋白質(zhì)和賴氨酸含量對奶牛產(chǎn)奶性能和氮利用及代謝激素的影響[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

5 王建華;戈新;張寶s，

本文編號：1863631