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小反芻獸疫病毒N蛋白原核表達(dá)與間接ELISA檢測(cè)方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2018-05-06 23:04

  本文選題:小反芻獸疫 + N活性蛋白��; 參考:《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年01期


【摘要】:小反芻獸疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要結(jié)構(gòu)蛋白,也是診斷小反芻獸疫的主要靶蛋白。為獲得高效表達(dá)的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反芻獸疫的間接ELISA檢測(cè)方法,通過(guò)優(yōu)化密碼子、優(yōu)化表達(dá)條件等條件探索,在大腸埃希菌表達(dá)系統(tǒng)中獲得了高效表達(dá)的可溶性N蛋白,進(jìn)一步基于N蛋白建立了間接ELISA檢測(cè)方法,該方法對(duì)其他相關(guān)的羊類病原無(wú)交叉反應(yīng),其組內(nèi)與組間變異系數(shù)均低于9%,具有良好的重復(fù)性。對(duì)480份臨床血清樣品進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)用法國(guó)IDVET競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒進(jìn)行比較,符合率達(dá)到98.33%。本研究為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)成熟的小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:PPRVN protein of small ruminant ruminant virus is the main structural protein of virus particles and the main target protein for diagnosis of small ruminant disease. In order to obtain highly expressed soluble N protein and to establish an indirect ELISA detection method for small ruminant disease based on N protein, the codon and expression conditions were optimized. A highly expressed soluble N protein was obtained in Escherichia coli expression system, and an indirect ELISA detection method based on N protein was established. The coefficient of variation within and between groups was lower than 9 and had good reproducibility. 480 clinical serum samples were detected and compared with French IDVET competitive ELISA kit. The coincidence rate was 98.33%. This study laid a foundation for the further development of mature small animal ruminant antibody detection kit.
【作者單位】: 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:國(guó)家重點(diǎn)計(jì)劃研發(fā)項(xiàng)目(2016YFD0500901)
【分類號(hào)】:S852.65

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10 趙文姬;小反芻獸疫病毒熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立及F基因的分子特性研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2009年



本文編號(hào):1854283

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