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表達豬細小病毒VP2蛋白的豬偽狂犬病病毒rPRV-VP2株的生物學(xué)特性

發(fā)布時間:2018-05-06 18:20

  本文選題:重組 + 豬細小病毒。 參考:《中國獸醫(yī)學(xué)報》2017年01期


【摘要】:探索重組PPV VP2基因的豬偽狂犬病病毒rPRV-VP2株作為弱毒疫苗候選株的潛在價值,對其在多種細胞上的增殖特性、病毒滴度、最適培養(yǎng)細胞中的遺傳穩(wěn)定性、一步生長曲線、轉(zhuǎn)錄和翻譯水平等生物學(xué)特性進行研究,并初步探索對小鼠安全性。結(jié)果顯示:重組病毒rPRV-VP2株在VERO、ST、PK-15和IPEC細胞上的TCID50分別為104.375/0.1mL、106.5/0.1mL、103.75/0.1mL、105.625/0.1mL。重組毒與親本毒PRV HB-98株在ST細胞中的毒力(106.125 TCID50/0.1mL)和細胞病變相當,重組病毒保持了PRV病毒的通性。連續(xù)傳毒20代后的綠色熒光觀察、RTPCR、Western blot試驗結(jié)果均表明重組病毒中的VP2基因得到了有效表達,且遺傳穩(wěn)定性良好。安全性試驗結(jié)果顯示:重組毒對小鼠安全。本試驗為后期對PPV VP2基因重組豬偽狂犬病毒rPRV-VP2株的開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:To explore the potential value of recombinant porcine pseudorabies virus (rPRV-VP2) strain of recombinant PPV VP2 gene as a candidate strain of attenuated virus vaccine, to study its proliferation characteristics, virus titer, genetic stability and one-step growth curve in a variety of cells, and to investigate the potential value of recombinant porcine pseudorabies virus rPRV-VP2 strain as a candidate strain of attenuated vaccine. The biological characteristics of transcription and translation were studied, and the safety of mice was preliminarily explored. The results showed that the TCID50 of the recombinant rPRV-VP2 strain on VEROSTN PK-15 and IPEC cells was 104.375 / 0.1 mL / 106.55 / 103.75 / 0.1 mL / 105.625 / 0.1 mL, respectively. The virulence of recombinant virus in St cells was about the same as that of parental PRV HB-98 strain (106.125 TCID 50% 0.1 mL), and the recombinant virus kept the integrity of PRV virus. After 20 generations of continuous transmission of the virus, the results of green fluorescence observation showed that the VP2 gene in the recombinant virus was effectively expressed and the genetic stability was good. The results of safety test showed that the recombinant virus was safe to mice. This experiment laid a foundation for the development and utilization of recombinant porcine pseudorabies virus rPRV-VP2 strain with PPV VP2 gene.
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;大北農(nóng)集團動物醫(yī)學(xué)研究中心;
【基金】:河南省重大科技專項資助項目(111100110300)
【分類號】:S852.651

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本文編號:1853371

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