H1N1甲型流感—豬瘟病毒雙價(jià)活載體疫苗研制
本文選題:H1N1 + 甲型流感; 參考:《山東師范大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:豬瘟(Classical swine fever CSF),又名豬霍亂或歐洲豬瘟,是一種高致病性,高致死率和高傳染性的多系統(tǒng)出血性疾病。豬瘟病毒為其病原,該病的天然宿主為家豬和野豬,歷史上有過多次的豬瘟的大爆發(fā),每一次的爆發(fā)都會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,對(duì)各國的家豬養(yǎng)殖業(yè)和國際間的豬產(chǎn)品貿(mào)易危害極大,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類傳染病。 豬瘟病毒屬于黃病毒科(Flaviviridae family),瘟病毒屬(Pestivirusgenus)。豬瘟病毒是單股正鏈RNA病毒,病毒顆粒的直徑大小為40 60nm,基因組大小為12.3kb。其外則具有包膜結(jié)構(gòu)。豬瘟病毒的基因組主要包括一個(gè)5’端非編碼區(qū)(5’UTR),其后面是一個(gè)巨大的開放閱讀框(ORF)區(qū),最后面則是一個(gè)3’端非編碼區(qū)(3’UTR)。 豬瘟病毒有4個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白:衣殼蛋白C,囊膜蛋白Erns, E1和E2。8個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白:Npro, P7, NS2, NS3,NS4A, NS4B, NS5A和NS5B。 目前我國預(yù)防豬瘟病毒所用的疫苗主要為1954年選育出“54-III系兔化毒”,即C株。C株以其免疫力強(qiáng),保持效果持久,遺傳性質(zhì)穩(wěn)定及無殘余毒力等優(yōu)點(diǎn),在國際上被公認(rèn)為效果最好的豬瘟弱毒疫苗,已經(jīng)得到大面積推廣和應(yīng)用,在開發(fā)作為其他豬病疫苗載體方面也有很好的前景。 流行性感冒病毒(influenza virus),屬于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)流感病毒分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,是流行性感冒(流感)的病原體。上個(gè)世紀(jì)共發(fā)生過三次世界性的大流行:1918年,H1N1引起的西班牙流感,1957年H2N2引起的亞洲流感和1968年,H3N2引起的香港流感。進(jìn)入到本世紀(jì),2009年4月,一種新型的H1N1豬流感病毒在人類身上檢測(cè)出來,并且于2009年9月份開始演變?yōu)槭澜缧缘拇罅鞲性谌祟愔醒杆賯鞑ァ?目前,全世界大流行的H1N1甲型流感正在威脅人類健康,對(duì)其病原分析發(fā)現(xiàn)該病毒與豬流感病毒有最高的核酸序列同源性,表明其起源于豬流感病毒。在我們投入大量的人力物力防控該病毒在人與人之間流行的時(shí)候,如何從源頭上有效切斷流感病毒從豬傳染給人是必須考慮的問題。對(duì)于病毒性疾病,最有效的防控辦法是用有效的疫苗預(yù)防接種,而目前我國尚沒有預(yù)防豬的H1N1甲型流感的正規(guī)疫苗可用。因此,研發(fā)控制H1N1甲型流感病毒在豬與豬之間傳播的疫苗迫在眉睫。 本研究利用我們實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)構(gòu)建的兔化弱毒株感染性cDNA以及從合作單位獲得的H1N1的HA基因,構(gòu)建豬瘟-H1N1甲型流感嵌合疫苗,以期在進(jìn)行豬瘟計(jì)劃免疫的同時(shí),防控豬流感病毒,避免豬流感病毒在豬與豬之間傳播,從而可能從源頭上切斷H1N1甲型流感病毒從豬傳染給人的途徑,為H1N1甲型流感病毒的防控奠定基礎(chǔ)。同時(shí),本研究建立的CSFV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法靈敏度非常高,,能夠準(zhǔn)確的檢測(cè)到PK-15細(xì)胞中CSFV的存在,為今后的以兔化弱毒株cDNA為載體的疫苗實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Classical swine fever (CSF) is a multisystem hemorrhagic disease with high pathogenicity, high mortality and high infectivity. Swine fever virus is the pathogen, the natural host of the disease is domestic pigs and wild boars. There have been many outbreaks of swine fever in history, each outbreak will cause huge economic losses. It is very harmful to domestic pig breeding and international trade in pig products, and is classified as Class A infectious disease by the World Organization of Animal Health (OIE). Swine fever virus belongs to Flaviviridae family of Flaviviridae and Pestivirusgenusus. Classical swine fever virus (CSFV) is a single-stranded RNA virus with a particle diameter of 40 ~ 60nm and a genome size of 12.3 kb. On the other hand, it has a envelope structure. The genome of CSFV mainly consists of a 5'-terminal non-coding region, followed by a large open reading frame (ORF) region, and a 3'terminal non-coding region (UTR3). There are four structural proteins of CSFV: capsid protein C, envelope protein Erns, E1 and E2.8 non-structural proteins: npro. P7, NS2, NS3NS4A, NS4B, NS5A and NS5B. At present, the main vaccine used to prevent swine fever virus in China is the "54-III strain rabbit chemical virus" bred in 1954, that is, strain C has the advantages of strong immunity, lasting effect, stable genetic property and no residual virulence. The attenuated swine fever vaccine, which has been recognized as the best vaccine in the world, has been widely used and has a good prospect in the development of other swine vaccine vectors. Influenza virus, Orthomyxoviridae3, is the pathogen of influenza. There were three worldwide pandemics in the last century: Spanish influenza caused by H1N1 in 1918, Asian influenza caused by H2N2 in 1957 and Hong Kong influenza caused by H3N2 in 1968. In this century, in April 2009, a new type of H1N1 swine flu virus was detected in humans, and in September 2009, it began to develop into a worldwide pandemic influenza spread rapidly in humans. At present, pandemic influenza A (H1N1) in the world is threatening human health. It is found that the virus has the highest nucleic acid sequence homology with swine influenza virus, which indicates that it originated from swine flu virus. When we invest a lot of manpower and material resources to prevent and control the virus from people to people, how to effectively cut off the transmission of influenza virus from pigs to people is a problem that must be considered. For viral diseases, the most effective method of prevention and control is to use effective vaccination, but at present, there is no regular vaccine available for the prevention of swine H1N1 influenza A in China. Therefore, it is urgent to develop a vaccine to control the transmission of H1N1 influenza A virus between pigs and pigs. In this study, we used the HA gene of rabbitized attenuated strain cDNA and H1N1 obtained from our laboratory to construct swine fever H1N1 influenza A chimeric vaccine, in order to prevent and control swine flu virus while carrying out swine fever program immunization. To avoid the transmission of swine flu virus between pigs and pigs, it may cut off the transmission of H1N1 A influenza virus from swine to human from the source, and lay the foundation for the prevention and control of H1N1 influenza A virus. At the same time, the laboratory detection method of CSFV established in this study has very high sensitivity and can accurately detect the presence of CSFV in PK-15 cells, which will lay a foundation for the future vaccine experiment with rabbit attenuated strain cDNA as vector.
【學(xué)位授予單位】:山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S859.797
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1838665
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