本文選題：馬立克病毒 + SC-��； 參考：《中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年05期

【摘要】：分析缺失meq基因的重組馬立克病病毒SC9-1原代、10代及40代主要基因序列的同源性。提取缺失meq基因的重組馬立克病病毒SC9-1原代、10代及40代DNA,設(shè)計(jì)引物PCR擴(kuò)增其與致瘤相關(guān)pp38基因、缺失meq基因后殘余的FRT位點(diǎn)序列及囊膜蛋白基因gB、gC、gD、gE、gH、gI、gK,連接pMD18-T載體,轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)胞,挑取陽性克隆進(jìn)行測序,DNAStar軟件對(duì)3代次各基因片段進(jìn)行同源性比對(duì)。不同代次SC9-1病毒株的致瘤相關(guān)pp38基因、殘留FRT位點(diǎn)序列及囊膜蛋白基因gB、gC、gD、gE、gH、gI、gK的核苷酸序列同源性均為100%,核苷酸序列差異性分析結(jié)果顯示序列完全一致,無位點(diǎn)上的變化。缺失meq基因的重組馬立克病病毒SC9-1在雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)上的傳代過程中其致瘤相關(guān)pp38基因、殘留FRT位點(diǎn)序列及囊膜蛋白基因gB、gC、gD、gE、gH、gI、gK沒有發(fā)生變異,側(cè)面反映了SC9-1在CEF細(xì)胞傳代過程中具有很好的遺傳穩(wěn)定性。
[Abstract]:To analyze the homology of the main gene sequences of the recombinant Marek disease virus (SC9-1) with deletion of meq gene in 10 and 40 generations of Marek's disease virus (Marek's disease virus). The recombinant SC9-1 of Marek's disease virus (Marek's disease virus) with deletion of meq gene was extracted from the 10 and 40 generations of SC9-1. Primers were designed to amplify the pp38 gene associated with tumorigenesis. The remaining FRT loci of meq gene and the envelope protein gene (gBGCU gDgEgEgHngHngGK) were sequenced and ligated to the pMD18-T vector, and the DNA of Marek's disease virus (Marek's disease virus) was amplified by PCR. The positive clones were transformed into DH5 偽 competent cells and sequenced by DNA Star software to compare the homology of three generations of gene fragments. The nucleotide sequence homology of the oncogenic pp38 gene, the residual FRT locus, and the envelope protein gene (gBGCngDG) gEG HG Ig K of different generations of SC9-1 virus strains were 100 and 100, respectively. The results of nucleotide sequence difference analysis showed that the sequence was completely consistent, and there was no change in the nucleotide sequence. During the passage of recombinant Marek disease virus (SC9-1) with deletion of meq gene in chicken embryo fibroblast, its tumor-associated pp38 gene, residual FRT locus sequence and envelope protein gene gBGCngDGDG EG HG Ig K were not mutated. The results showed that SC9-1 had good genetic stability in the passage of CEF cells.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31402235)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1837202