本文選題：新城疫 + 耐核糖核酸酶　； 參考：《畜牧與獸醫(yī)》2017年06期

【摘要】：為制備檢測新城疫病毒的實(shí)時熒光RT-PCR病毒樣顆粒內(nèi)標(biāo),擴(kuò)增MS2噬菌體的成熟酶蛋白和衣殼蛋白序列,將其定向插入pET32a載體的相應(yīng)位置,雙酶切和PCR鑒定,構(gòu)建pET32a-MS2重組質(zhì)粒;根據(jù)新城疫病毒實(shí)時熒光RT-PCR檢測的目標(biāo)片段,采用化學(xué)合成和klenow酶連接技術(shù)制備內(nèi)標(biāo)片段,將內(nèi)標(biāo)片段插入pET32a-MS2重組質(zhì)粒,構(gòu)建pET32a-MS2-IC重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)RNase和DNase消化后,采用熒光RT-PCR檢測耐核糖核酸酶病毒樣顆粒內(nèi)標(biāo)的含量。結(jié)果表明,制備了高表達(dá)量耐核糖核酸酶病毒樣顆粒內(nèi)標(biāo),可用于新城疫病毒實(shí)時熒光RT-PCR檢測方法的建立。
[Abstract]:In order to prepare the real - time fluorescent RT - PCR virus - like particle internal standard for the detection of Newcastle disease virus , the mature enzyme protein and capsid protein sequence of the 2 2 phage were amplified , and the recombinant plasmid pET32a - 2 2 was constructed by the method of chemical synthesis and klenow enzyme ligation .

【作者單位】： 宣城市畜牧獸醫(yī)局;宣州區(qū)畜牧獸醫(yī)管理局;安徽華衛(wèi)集團(tuán)禽業(yè)有限公司;
【分類號】：S852.65

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本文編號：1836498