本文選題：仔豬 + 免疫應(yīng)激　； 參考：《中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院》2015年碩士論文

【摘要】：肌纖維亞型的組成直接影響肌內(nèi)脂肪含量、嫩度以及肉色等肉品質(zhì)特性。在動(dòng)物初生階段極易發(fā)生免疫應(yīng)激。免疫應(yīng)激導(dǎo)致動(dòng)物血漿中TNF-α等炎性細(xì)胞因子水平急劇升高。體外研究發(fā)現(xiàn),TNF-α可使C2C12細(xì)胞中Ⅰ型肌纖維m RNA表達(dá)量降低,Ⅱ型肌纖維m RNA表達(dá)量升高。由此推測(cè),幼齡動(dòng)物發(fā)生免疫應(yīng)激時(shí),可能通過TNF-α等調(diào)控肌纖維亞型的表達(dá)。為驗(yàn)證上述推測(cè),本論文開展了以下研究,為今后通過調(diào)控仔豬免疫應(yīng)激,提高仔豬生產(chǎn)性能,改善豬肉品質(zhì)提供理論基礎(chǔ)。1、免疫應(yīng)激對(duì)仔豬骨骼肌纖維亞型轉(zhuǎn)化的影響選取16頭斷奶大白仔豬,隨機(jī)分為對(duì)照組、LPS組。LPS組隔天靜脈注射Lipopolysaccharide(LPS),初始注射劑量80μg/kg.BW,隨后逐次遞增30%,對(duì)照組注射相應(yīng)劑量的生理鹽水,試驗(yàn)期15 d。研究發(fā)現(xiàn):注射第9天,仔豬血漿中的IL-6、TNF-α和結(jié)合珠蛋白仍顯著升高,表明仔豬處于慢性免疫應(yīng)激。骨骼肌中My HC1 m RNA和蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),My HC2b m RNA和My HC2蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05),CaN、PGC-α表達(dá)量顯著降低(P0.05),背最長肌中氧化酶活性顯著降低(P0.05),酵解型酶活性顯著升高(P0.05),表明遞增注射LPS誘導(dǎo)仔豬慢性免疫應(yīng)激,導(dǎo)致骼肌肌纖維由Ⅰ型向Ⅱ型轉(zhuǎn)化。2、體內(nèi)大鼠模型探究TNF-α對(duì)骨骼肌纖維亞型轉(zhuǎn)化的影響及機(jī)制選取72只4周齡斷奶SD雄性大鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組、LPS組和單抗組(LPS+TNF-α單抗組),LPS組和單抗組分別在1、3、5、7d腹腔注射LPS,初始注射劑量1 mg/kg.BW,以后每次遞增30%,對(duì)照組注射相應(yīng)劑量的生理鹽水,單抗組在注射LPS前1h腹腔注射2 mg/kg.BW的英夫利昔。后4周不做任何處理。研究發(fā)現(xiàn):遞增注射LPS導(dǎo)致大鼠血清中TNF-α等炎性細(xì)胞因子水平升高,同時(shí)降低CaN和PGC-α的表達(dá)水平,并誘導(dǎo)骨骼�、裥拖颌蛐娃D(zhuǎn)化;利用單抗降低TNF-α水平,同時(shí)也緩解了骨骼肌纖維亞型的轉(zhuǎn)化,表明肌纖維亞型的轉(zhuǎn)化可能與TNF-α升高有關(guān)。停止注射LPS后,MyHC亞型表達(dá)量無顯著差異,表明免疫應(yīng)激停止后,其對(duì)骨骼肌纖維亞型的影響逐漸消除。3、體外細(xì)胞培養(yǎng)探究TNF-α對(duì)骨骼肌纖維亞型轉(zhuǎn)化的機(jī)制用10%的胎牛血清生長培養(yǎng)基培養(yǎng)C2C12細(xì)胞,接種于96孔板和6孔板中,待其融合達(dá)到80%后,用2%滅活馬血清分化培養(yǎng)基取代生長培養(yǎng)基,誘導(dǎo)分化3 d后,在培養(yǎng)液中加入不同濃度的TNF-α(0 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/m L、20 ng/mL),繼續(xù)培養(yǎng)3 d后,每個(gè)梯度3個(gè)重復(fù)。研究發(fā)現(xiàn):TNF-α顯著提高了MyHC2b/My HC1的比值(P0.05)。表明:TNF-α誘導(dǎo)了肌纖維亞型從Ⅰ型向Ⅱ型的轉(zhuǎn)化。同時(shí)TNF-α顯著降低胞內(nèi)Ca2+濃度(P0.05),表明免疫應(yīng)激升高TNF-α,可能通過下調(diào)Ca2+/CaN/PGC-α途徑,誘導(dǎo)骨骼肌纖維亞型轉(zhuǎn)化。綜上所述,遞增注射LPS模擬慢性免疫應(yīng)激,誘導(dǎo)仔豬、大鼠骨骼肌纖維由Ⅰ型向Ⅱ型轉(zhuǎn)化;這種轉(zhuǎn)化與提高血清中TNF-α水平有關(guān)。TNF-α升高可能通過下調(diào)Ca2+/CaN/PGC-α途徑調(diào)控骨骼肌亞型的表達(dá)。
[Abstract]:The composition of muscle fiber subtype directly affects meat quality characteristics such as muscle fat content, tenderness and meat color. Immune stress is easy to occur in the newborn stage of animals. The level of inflammatory cytokines such as TNF- 偽 in animal plasma was increased sharply by immune stress. It was found that TNF- 偽 could decrease the expression of type 鈪，

本文編號(hào)：1825500