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胸膜肺炎放線桿菌三聚體自轉(zhuǎn)運(yùn)黏附素莖部功能區(qū)表達(dá)及其與豬肺組織結(jié)合蛋白的篩選分析

發(fā)布時間:2018-04-23 17:21

  本文選題:胸膜肺炎放線桿菌 + 三聚體自轉(zhuǎn)運(yùn)黏附素; 參考:《微生物學(xué)通報(bào)》2017年12期


【摘要】:【目的】胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)可引發(fā)豬的傳染性胸膜肺炎,給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失。黏附是APP在致病過程中的第一步,新型黏附分子——三聚體自轉(zhuǎn)運(yùn)黏附素(Trimeric autotransporter adhesin,TAA)是該菌感染肺組織的重要毒力因子,莖部區(qū)2 464-2 574氨基酸(BD3)序列區(qū)域在細(xì)菌的黏附中發(fā)揮重要作用,但其如何結(jié)合肺臟組織尚屬未知。本文表達(dá)TAA的莖部功能區(qū),篩選其在肺組織中的結(jié)合蛋白!痉椒ā吭吮磉_(dá)及純化TAA功能區(qū)BD3蛋白,與豬肺組織共孵育,通過免疫共沉淀技術(shù)捕獲BD3的結(jié)合蛋白并質(zhì)譜鑒定。構(gòu)建豬c DNA文庫獲取該蛋白核酸序列,進(jìn)行生物信息學(xué)分析!窘Y(jié)果】經(jīng)質(zhì)譜分析獲得與BD3結(jié)合的豬肺組織蛋白的肽段,數(shù)據(jù)庫搜尋比對發(fā)現(xiàn)角蛋白1為TAA BD3區(qū)與豬肺組織結(jié)合的蛋白;構(gòu)建c DNA文庫篩選并測序后獲知其基因序列。生物信息學(xué)分析顯示該序列與豬源及人源角蛋白核酸序列相似性低,豬源細(xì)胞角蛋白1作為一個單獨(dú)的進(jìn)化分支,與其他角蛋白差異較大;該蛋白在8-100 aa處有一個跨膜區(qū);主要二級結(jié)構(gòu)元件為α螺旋和β折疊;該蛋白在82-362 aa處存在一個G蛋白α亞單位,在515-552 aa處存在一個TSP1區(qū)域(凝血酶敏感蛋白1型重復(fù)區(qū)域)!窘Y(jié)論】與TAA莖部BD3結(jié)合的豬肺組織角蛋白1的發(fā)現(xiàn),為TAA黏附肺組織細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ),有助于揭示APP專嗜肺組織的致病機(jī)制。
[Abstract]:[objective] Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) can cause infectious pleural pneumonia in pigs and cause great loss to the world pig industry. The 2 464-2 574 amino acid sequence region of stem region plays an important role in bacterial adhesion, but how it binds to lung tissue is still unknown. A porcine c DNA library was constructed to obtain the nucleic acid sequence and bioinformatics analysis. [results] the peptide fragment of porcine lung tissue protein bound to BD3 was obtained by mass spectrometry. It was found that keratin 1 was a protein binding to porcine lung tissue in TAA BD3 region, and the c DNA library was constructed and sequenced to obtain its gene sequence. The main secondary structural elements are 偽 helix and 尾 folding, and there is a G protein 偽 subunit at 82-362 AA. It is helpful to reveal the pathogenetic mechanism of APP specific lung tissue.
【作者單位】: 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31520103917)~~
【分類號】:S852.61

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本文編號:1792895

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