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EHEC O157:H7 z3276基因缺失株構(gòu)建及其生物學(xué)特性

發(fā)布時間:2018-04-23 11:02

  本文選題:O + H。 參考:《微生物學(xué)通報(bào)》2017年12期


【摘要】:【目的】腸出血性大腸桿菌O157:H7是世界范圍內(nèi)重要的動物源性致病菌之一,可感染人。I型菌毛是多種致病性大腸桿菌(如腎盂腎炎型大腸桿菌等)可表達(dá)的一種黏附結(jié)構(gòu),與細(xì)菌吸附黏膜表面密切相關(guān)。然而,O157:H7 fim操縱子上幾個核苷酸的缺失卻導(dǎo)致其不能表達(dá)I型菌毛。BLAST比對結(jié)果表明O157:H7獨(dú)有的開放閱讀框z3276編碼的氨基酸序列與其他大腸桿菌I型菌毛高度同源,這可能是對O157:H7不能表達(dá)I型菌毛的補(bǔ)償機(jī)制,但確切功能尚不清楚。本文探究z3276基因的生物學(xué)功能!痉椒ā坷肙157:H7 86-24參考菌株構(gòu)建z3276基因缺失株(?z3276),并構(gòu)建其互補(bǔ)株(C?z3276),進(jìn)而比較親本株、?z3276與C?z3276的生物學(xué)特性及對小鼠致病性差異。【結(jié)果】與親本株相比,?z3276進(jìn)入對數(shù)生長期的時間延后,在半固體瓊脂平板上的遷移直徑明顯縮小,生物被膜形成能力顯著減弱。?z3276對HEp-2細(xì)胞的黏附和侵襲能力并無明顯變化,但對IPEC-J2細(xì)胞的侵襲能力明顯減弱。在小鼠攻毒試驗(yàn)中,?z3276組排菌數(shù)量減少、排菌持續(xù)時間縮短。C?z3276各項(xiàng)特性均能回復(fù)到與親本株一致的水平!窘Y(jié)論】z3276基因可能是O157:H7重要的毒力相關(guān)因子。
[Abstract]:[objective] Enterohemorrhagic Escherichia coli (O157:H7) is one of the most important animal pathogenic bacteria in the world. The infection of human type I fimbriae is an adhesive structure that can be expressed in many pathogenic Escherichia coli, such as pyelonephritis. It is closely related to the surface of mucous membrane adsorbed by bacteria. However, the deletion of several nucleotides on the O157: H7 fim operon resulted in its inability to express type I fimbriae. The results showed that the amino acid sequence encoded by O157:H7 unique open reading frame z3276 was highly homologous to other Escherichia coli type I pili. This may be a compensatory mechanism for the inability of O157:H7 to express type I fimbriae, but the exact function remains unclear. In this paper, the biological function of Z3276 gene was studied. [methods] using O157:H7 86-24 reference strain to construct Z3276 gene deletion strain, and to construct its complementary strain Cnz3276, and then to compare the biological characteristics and pathogenicity to mice between the parent strain of Z3276 and C?z3276. [ Results] compared with the parent strain, the time of entering logarithmic growth period of Z3276 was delayed. The migration diameter on the semi-solid Agar plate was significantly reduced, and the ability of biofilm formation was significantly decreased. The adhesion and invasion of HEp-2 cells were not significantly changed by .z3276, but the invasion ability of IPEC-J2 cells was significantly decreased. In the strain attack test of mice, the number of bacteria excreted in Z3276 group was decreased, and the duration of excretion was shortened. All the characteristics of Cnz3276 could return to the same level as the parent strain. [conclusion] Z3276 gene may be an important virulence related factor of O157:H7.
【作者單位】: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部獸用生物制品工程技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家獸用生物制品工程技術(shù)研究中心;省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地—江蘇省食品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31572503) 江蘇省自主創(chuàng)新基金項(xiàng)目(No.CX(15)1060)~~
【分類號】:S852.612

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本文編號:1791672

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