新城疫病毒F蛋白在水稻中的表達(dá)及檢測
本文選題:新城疫病毒 + F基因; 參考:《畜牧獸醫(yī)學(xué)報》2017年06期
【摘要】:旨在研究水稻表達(dá)新城疫病毒F蛋白,制備亞單位疫苗。根據(jù)GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏愛性密碼子篩選、優(yōu)化并合成F基因,通過兩次載體構(gòu)建,先使目的基因連在中間載體pMP3上,再連接到pCAMBIA1300植物載體上,通過農(nóng)桿菌導(dǎo)入水稻愈傷組織中,經(jīng)過潮霉素抗性篩選,獲得表達(dá)植株。通過QPCR的方法篩選獲得高表達(dá)的純合子株系5株。新城疫抗原試紙條檢測和Western blot檢測確定F蛋白具有良好的反應(yīng)原性。本試驗為家禽傳染病的植物性水稻疫苗研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The purpose of this study was to study the expression of Newcastle disease virus F protein in rice and to prepare subunit vaccine. According to the sequence of Newcastle disease virus F gene in GenBank and the rice preference codon, F gene was optimized and synthesized. The target gene was first linked to the intermediate vector pMP3 and then connected to the pCAMBIA1300 plant vector. Through Agrobacterium tumefaciens introduced into rice callus, hygromycin resistant screening was used to obtain the expressed plants. Five homozygous lines with high expression were screened by QPCR. The detection of Newcastle disease antigen and Western blot confirmed that F protein had good reactivity. This study laid a foundation for the study of plant rice vaccine for poultry infectious diseases.
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物免疫學(xué)重點實驗室農(nóng)業(yè)部動物免疫學(xué)重點實驗室河南省動物免疫學(xué)重點實驗室;鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:獸用蛋白功能性轉(zhuǎn)基因水稻新品種培育(2016ZX08001006) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項經(jīng)費(fèi)項目(201303033)
【分類號】:S852.65
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,本文編號:1777581
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