本文選題：奶牛 + 大腸桿菌��； 參考：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：大腸桿菌(Escherichia coli,E. coli)是引起奶牛乳腺炎的一種重要病原菌,并可引起奶牛乳腺纖維化,患牛泌乳量降低,甚至乳腺失去泌乳功能而導(dǎo)致奶牛淘汰。奶牛乳腺成纖維細胞(BMFB)是乳腺組織中主要間質(zhì)細胞,研究大腸桿菌對體外培養(yǎng)奶牛乳腺成纖維細胞相關(guān)因子和受體表達及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響,對奶牛乳腺纖維化的防治具有重要意義。本研究采用奶牛乳腺炎源性熱滅活的E.coli (0 CFU/mL、105CFU/mL、106 CFU/mL和108CFU/mL)作用于體外培養(yǎng)的BMFB,于不同的時間點(6h、12 h、24 h和48 h)提取細胞的總mRNA和總蛋白,采用實時熒光定量PCR法(RT-PCR)和Western-blot方法檢測TLR2、TLR4的mRNA和蛋白表達水平；采用Western-blot方法檢測核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和AP-1的蛋白表達水平；采用RT-PCR和Western-blot方法檢測促纖維化細胞因子TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TβRI、FGFR2、 PDGFRβ的mRNA口蛋白表達。結(jié)果表明：(1)不同濃度的熱滅活E. coli菌液在不同的時間點均可以顯著促BMFBTGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TβRI、FGFR2、PDGFRβ的mRNA和蛋白的表達。BMFBTGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TPRI、FGFR2、PDGFRβ的mRNA的表達呈正時效關(guān)系,E. coli的作用早期mRNA表達量呈升高趨勢,隨著作用時間延長mRNA表達量升高趨勢逐漸減弱；各因子及其受體的蛋白表達均是隨著作用時間延長而升高,但是在作用后期升高趨勢降低,呈正時效關(guān)系。(2)不同濃度的熱滅活E. coli菌液作用于BMFB,在不同的時間點均可以顯著促進BMFB TLR2和TLR4 mRNA和蛋白的表達,且呈正時效性。TLR2 mRNA和蛋白表達水平顯著升高,并且TLR2 mRNA和蛋白的表達呈時效性和量效性,于48 h達到最高(P0.05)。TLR4 mRNA和蛋白表達水平顯著升高,并且TLR4 mRNA和蛋白的表達呈時效性和量效性,分別于24 h和12h達到最高后逐漸下降(P0.05)。(3) E.coli也顯著促進了BMFB p-NF-KB-p65和p-c-jun蛋白的表達,基本呈正時效關(guān)系。p-NF-KB-p65的表達與大腸桿菌作用濃度呈現(xiàn)正量效關(guān)系,表達量隨作用時間延長先升高后逐漸降低,于12h達到高峰后逐漸下降(p0.05)。AP-1的表達與大腸桿菌作用濃度呈現(xiàn)正量效關(guān)系,表達量隨作用時間延長先升高后逐漸降低,于24h達到高峰后逐漸下降(p0.05)。綜上所述,熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB的TGF-β1、bFGF、 PDGF-BB、TGFβRI、FGFR2和PDGFRβ mRNA和蛋白的表達,并且呈一定的時效與量效關(guān)系。熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB TLR2和TLR4 mRNA和蛋白的表達,并且呈現(xiàn)一定的時效關(guān)系。TLR2和TLR4均參與了E. coli對BMFB的作用。熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB p-NF-κB-p-65和p-c-jun蛋白的表達。E. coli對BMFB可通過激活NF-κB和AP-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑產(chǎn)生并分泌促纖維化細胞因子。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61

【參考文獻】

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