發(fā)布時(shí)間：2018-04-15 09:18

  本文選題：鴿子瘦素 + 成熟肽序列��； 參考：《江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年01期

【摘要】：根據(jù)鴿子瘦素基因(leptin)編碼區(qū)序列(Gen Bank:HG797022)設(shè)計(jì)并合成鴿子leptin基因編碼胞外域成熟肽的c DNA序列,然后將這段序列克隆到表達(dá)載體p GEX-4T-1的Eco R I與Not I酶切位點(diǎn)之間,構(gòu)建重組表達(dá)載體(p GEX-4T-1-leptin)并將該載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Arctic Express中。轉(zhuǎn)化菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后表達(dá)了分子量為44 270的鴿子leptin重組蛋白。經(jīng)鎳柱親和層析純化后的重組蛋白質(zhì)與礦物油佐劑混合,免疫日本大耳白兔,制備抗leptin多克隆抗體。經(jīng)過4次免疫之后,獲得高效價(jià)的抗leptin多克隆抗體。
[Abstract]:The c DNA sequence encoding extracellular mature peptide of pigeon leptin gene was designed and synthesized according to the encoding region of pigeon leptin gene, GenBank: HG797022). The sequence was cloned between Eco RI and Not I sites of expression vector p GEX-4T-1.A recombinant expression vector, pGEX-4T-1-leptinin, was constructed and transformed into Escherichia coli Arctic Express.The recombinant protein of pigeon leptin with molecular weight of 44 270 was expressed after induction by IPTG.The recombinant protein purified by nickel affinity chromatography was mixed with mineral oil adjuvant to immunize Japanese white rabbits to prepare polyclonal antibodies against leptin.After 4 times of immunization, a high titer anti leptin polyclonal antibody was obtained.
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所動(dòng)物品種改良與繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東省家禽研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31501946) 江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(BK20150544)
【分類號(hào)】：S836

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1753485