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湖南地區(qū)Ⅰ型乙型腦炎病毒的分離鑒定及E基因序列分析

發(fā)布時間:2018-04-12 23:14

  本文選題:豬場 + 蚊子。 參考:《湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年02期


【摘要】:為探尋湖南汨羅地區(qū)豬場蚊子攜帶乙型腦炎病毒(JEV)的情況,對該地區(qū)3個豬場蚊子開展JEV的病原學(xué)調(diào)查研究。從該地區(qū)3個種豬場采集約3 900只蚊子,用RT PCR方法擴增JEV NS5基因,結(jié)果從40份樣品中檢出17份樣品呈陽性。將陽性樣品研磨液接種BHK 21細胞分離病毒,經(jīng)3次傳代后獲得了1株JEV,將新分離株命名為HNML1株。根據(jù)JEV的E基因序列設(shè)計1對引物,用RT PCR方法擴增HNML1株的E基因,并進行序列測定和同源性分析,結(jié)果表明,該E基因的核苷酸序列與減毒活疫苗株SA14 14 2相應(yīng)序列的同源性為86.9%;該E基因的氨基酸序列與減毒活疫苗株SA14 14 2相應(yīng)序列的同源性為97.0%,二者存在15個氨基酸的差異(其中包括8個與關(guān)鍵毒力相關(guān)的氨基酸);蛲葱苑治鼋Y(jié)果表明,HNML1株為基因Ⅰ型JEV毒株。
[Abstract]:In order to find out the situation of mosquitoes carrying Japanese encephalitis virus (JEV) in pig farms in Miluo area Hunan Province the etiology of JEV was investigated on three mosquito farms in this area.About 3 900 mosquitoes were collected from three pig farms in this area and JEV NS5 gene was amplified by RT PCR. 17 of 40 samples were positive.The positive sample grinding fluid was inoculated into BHK F21 cells to isolate the virus. After three passages, a strain of JEV was obtained, and the new strain was named HNML1 strain.According to the E gene sequence of JEV, a pair of primers were designed. The E gene of HNML1 strain was amplified by RT PCR method.The nucleotide sequence of the E gene is 86.9 with the corresponding sequence of the attenuated live vaccine strain SA14, and the amino acid sequence of the E gene is 97.0 with the corresponding sequence of the attenuated live vaccine strain SA14. There are 15 amino acids in the E gene.Differences (including 8 amino acids related to key virulence).The results of gene homology analysis showed that HNML1 strain was a type I JEV strain.
【作者單位】: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:湖南省科學(xué)技術(shù)廳重點課題(2012NK2001)
【分類號】:S852.65

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本文編號:1741861

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