針對(duì)豬瘟病毒E2蛋白的嵌合豬源化單克隆抗體的表達(dá)及抗病毒活性鑒定
本文選題:豬瘟病毒 + 單克隆抗體; 參考:《生物工程學(xué)報(bào)》2017年08期
【摘要】:豬瘟(Classical swine fever,CSF)是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的一種烈性傳染病,常造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織要求必須申報(bào)的動(dòng)物疫病之一。豬瘟的病原是豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),CSFV的結(jié)構(gòu)蛋白由衣殼蛋白(C)和囊膜糖蛋白(E~(rns)、E1、E2)構(gòu)成。E2蛋白是CSFV主要的保護(hù)性抗原,可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體,從而抵抗CSFV的感染。此前,本團(tuán)隊(duì)制備了一株針對(duì)CSFV E2蛋白的鼠源單克隆抗體HQ06。文中將HQ06抗體重鏈和輕鏈可變區(qū)基因與豬源恒定區(qū)基因嵌合后克隆至真核表達(dá)載體,利用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞制備一株針對(duì)CSFV E2蛋白的嵌合豬源化單克隆抗體c HQ06。應(yīng)用ELISA、Western blotting試驗(yàn)證實(shí)了c HQ06與CSFV E2蛋白具有良好的反應(yīng)性;中和試驗(yàn)結(jié)果表明c HQ06可以中和CSFV。綜上所述,本研究應(yīng)用CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)了具有良好反應(yīng)性和中和活性的針對(duì)CSFV E2蛋白的嵌合豬源化單克隆抗體c HQ06,為研究CSFV E2蛋白結(jié)構(gòu)、功能以及開(kāi)發(fā)新型的CSFV診斷和治療制劑奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Classical swine epidemic (CSFs) is a severe infectious disease in swine industry, which often causes huge economic losses and is one of the animal diseases that must be declared by the World Organization of Animal Health (OIE).The structural protein of classical swine fever virus (CSFV) of CSFV is composed of capsid protein (C) and envelope glycoprotein E1E2). E2 protein is the main protective antigen of CSFV, which can induce the production of neutralizing antibody and resist the infection of CSFV.Earlier, the team prepared a murine monoclonal antibody against CSFV E2, HQ06.In this paper, the heavy chain and light chain variable region genes of HQ06 antibody were chimeric with porcine constant region gene and cloned into eukaryotic expression vector. A chimeric porcine monoclonal antibody c HQ06against CSFV E2 protein was prepared by using Chinese hamster ovary Cho cells.The reaction of c HQ06 to CSFV E2 protein was confirmed by Elisa Western blotting test, and the neutralization test showed that c HQ06 could neutralize CSFV E2 protein.To sum up, CHO cells were used to stably express the chimeric porcine monoclonal antibody c HQ06against CSFV E2 protein with good reactivity and neutralization activity, which was used to study the structure of CSFV E2 protein.Function and development of new CSFV diagnostic and therapeutic agents lay the foundation.
【作者單位】: 天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31672537)資助~~
【分類號(hào)】:S852.4
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前8條
1 楊有武;楊有德;;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白的表達(dá)及多克隆抗體制備[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年09期
2 王姝;朱遠(yuǎn)茂;蔡紅;馬磊;史鴻飛;呂闖;董秀梅;高欲燃;薛飛;;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白單克隆抗體的制備及初步鑒定[J];中國(guó)生物工程雜志;2013年04期
3 李嬌;薛飛;朱遠(yuǎn)茂;祖立闖;;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白的截短表達(dá)與鑒定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2008年03期
4 高欲燃;朱遠(yuǎn)茂;康健;史鴻飛;李嬌;任憲剛;馮軍科;于作;薛飛;;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白的多克隆抗體制備及鑒定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2011年03期
5 聶明非;李巖;溫凱;賈瑩;王君偉;;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2010年07期
6 田宏;吳錦艷;尹雙輝;尚佑軍;鄭海學(xué);劉湘濤;;豬瘟重組蛋白E2的兔體免疫保護(hù)試驗(yàn)[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2009年S2期
7 鄧宇;藺濤;孫春清;張宏彪;張榮;龍進(jìn)學(xué);黃律;文心田;曹三杰;童光志;袁世山;鄭浩;;豬源牛病毒性腹瀉病毒SD0803株E2蛋白的表達(dá)及抗體制備[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年04期
8 高璐璐;張思春;郭煥成;涂長(zhǎng)春;;豬瘟病毒蛋白E2、N~(pro)基因的克隆表達(dá)及純化[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2012年08期
相關(guān)會(huì)議論文 前4條
1 高欲燃;朱遠(yuǎn)茂;史鴻飛;任憲剛;馮軍科;于作;薛飛;;牛病毒性腹瀉病毒重組E2蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年
2 賀番;凌理軍;廖亞金;李素;韓文;趙碧波;孫元;仇華吉;;β-actin與豬瘟囊膜蛋白E2相互作用并參與病毒復(fù)制[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年
3 李巖;賈瑩;溫凱;劉華;王君偉;;牛病毒性腹瀉病毒VEDEVAC株E2蛋白線性表位區(qū)的篩選[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年
4 覃紹敏;白安斌;吳健敏;廖文軍;袁書(shū)智;華俊;關(guān)忠誼;;抗人紅細(xì)胞單鏈抗體與豬瘟E2蛋白雙功能融合 蛋白的構(gòu)建及生物學(xué)活性檢測(cè)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集(上冊(cè))[C];2009年
相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條
1 楊嶺;豬瘟病毒流行毒株糖蛋白E2高變區(qū)氨基酸置換對(duì)疫苗C株獲得性免疫應(yīng)答的影響[D];浙江大學(xué);2015年
2 任艷;牛病毒性腹瀉病毒囊膜蛋白E2與牛胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞相互作用的分子機(jī)制研究[D];石河子大學(xué);2010年
3 賀番;基于偽型病毒的豬瘟中和抗體檢測(cè)方法的初步建立及豬瘟病毒E2蛋白的細(xì)胞定位研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條
1 武德鵬;豬瘟病毒E2蛋白碳納米管抗原的制備及其初步研究[D];河南科技大學(xué);2015年
2 仝麗娜;豬瘟病毒E2蛋白納米抗體的篩選及活性鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年
3 李嬌;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白的原核表達(dá)與巢式RT-PCR檢測(cè)方法的建立和應(yīng)用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年
4 高欲燃;牛病毒性腹瀉病毒重組E2蛋白多克隆抗體制備及間接ELISA方法的建立與應(yīng)用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年
5 胡剛?cè)~;重組豬瘟病毒E2桿狀病毒的構(gòu)建及其在蠶蛹中表達(dá)重組豬瘟E2蛋白[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年
6 聶明非;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白和NS3蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年
7 王姝;牛病毒性腹瀉病毒E2蛋白單克隆抗體的制備及IPMA方法的建立與初步應(yīng)用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年
8 徐興然;牛病毒性腹瀉病病毒中國(guó)毒株E2基因的鑒定及表達(dá)E2蛋白的抗原性研究[D];中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué);2002年
9 代興國(guó);重組E2蛋白在豬瘟的檢測(cè)及免疫方面的應(yīng)用研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2006年
,本文編號(hào):1741565
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/1741565.html