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犬三種白內(nèi)障模型的建立和氧化損傷性白內(nèi)障發(fā)展進程中AQPO表達的研究

發(fā)布時間:2018-04-11 20:24

  本文選題: + 白內(nèi)障模型; 參考:《西南大學》2015年碩士論文


【摘要】:目的:通過探究犬三種白內(nèi)障模型的建立并比較三種模型的優(yōu)缺點,選擇一種白內(nèi)障模型作為續(xù)試驗,并檢測該模型白內(nèi)障發(fā)展進程與AQPO表達之間的關系,探索AQPO對白內(nèi)障形成的影響。方法:(1)將60只平均年齡6月左右本地雜交犬,隨機分為6組,分別為氧化損傷性(Fenton)白內(nèi)障模型組、糖尿病性(STZ)白內(nèi)障模型組、硒性(亞硒酸鈉)白內(nèi)障模型組和各模型對照組,每組10只。每日用裂隙燈觀察并拍照,根據(jù)LOCSⅢ分級標準記錄晶狀體的結(jié)構(gòu)變化并分級。(2)選取40只本地雜交犬隨機分為2組,分模型組和對照組,每組20只,根據(jù)LOCSⅢ分級標準對白內(nèi)障的形成過程進行分級,并在模型組每級形成的時間節(jié)點上使用RT-PCR方法檢測晶狀體中AQPO的表達量。結(jié)果:(1)硒性白內(nèi)障模型,糖尿病性白內(nèi)障模型和氧化損傷性白內(nèi)障模型分級形成時間分別為C1(d):1±0.32、30±2.0和7±0.8。C2(d)分別為5±0.36、60±2.5和10±0.68。C3(d)分別為11±0.48、150±6.25和15±1.0。C4(d)分別為0、180±6.5和24±1.54。C5(d)分別為0、240±12和48±1.52。硒性白內(nèi)障造模時間最短,但毒性過大,死亡率高達100%,氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性白內(nèi)障成模時間短。(2)硒性白內(nèi)障C1形成時的犬只數(shù)量為10只,糖尿病性白內(nèi)障為7只,氧化損傷性白內(nèi)障模型為10只。C2形成時的犬只數(shù)量依次為10只、4只和10只。C3形成時依次為10只、3只和10只。C4形成時依次為0只、3只和10只。C5形成時依次為0只、3只和10只。三種白內(nèi)障模型對照組均為0只。氧化性白內(nèi)障模型的成模穩(wěn)定性較糖尿病性和硒性好。(3)三種造模方式均具可操縱性,而氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性和硒性略難。(4)三種白內(nèi)障模型裂隙燈的觀察:硒性白內(nèi)障在注射亞硒酸鈉生理鹽水后1d后出現(xiàn)試驗犬雙眼皮質(zhì)較多點狀混濁,5d后點狀混濁加深相連成散瞳后可見皮質(zhì)及周圍橢圓形陰影,大量空泡,11d后陰影面積擴大形成片狀,空泡量增多,陰影區(qū)眼底細節(jié)不清晰。糖尿病性白內(nèi)障注射STZ后30d出現(xiàn)晶狀體少量的小囊泡,60d后小囊泡增多成群,150d后小囊泡連成片狀陰影,并由四周向赤道部伸展,陰影部眼底細節(jié)不清晰,180d后皮狀陰影加深,范圍擴大,陰影眼底細節(jié)不可見,240d后晶狀體皮質(zhì)及核質(zhì)完全呈灰白色混濁。氧化性白內(nèi)障注射Fenton后第7d形成晶狀體皮質(zhì)點狀分布的小白點陰影但可觀察眼底,注射后第10d晶狀體皮質(zhì)點狀分布的小白點漸漸加深變大形成扇形分布的白色陰影,注射后第15d晶狀體皮質(zhì)扇形分布的白色陰影加深,范圍繼續(xù)擴大形成片狀,注射后24d片狀白色陰影擴展至晶狀體整個皮質(zhì),注射后第48d侵蝕形成成熟的皮質(zhì)性白內(nèi)障。(5)氧化損傷性白內(nèi)障模型發(fā)展進程中AQPO表達量變化的數(shù)據(jù)處理采用相對定量的△△Ct法,根據(jù)各個基因的標準曲線,通過測試樣的CT值得到相對應的數(shù)據(jù),以此比較Fenton注射的氧化性白內(nèi)障形成后的7d、10d,15d、24d、30d、40d、48d的AQPO表達量變化。AQPO表達量在第7d為1.90倍,表達量在此時為整個檢測中的最高峰值,AQPO表達量在第7d以后呈現(xiàn)遞減的趨勢,第10天為1.83倍,第15天為1.5倍,第24天為1.1倍,第48d為最低的0.6倍。AQPO的分布與晶狀體混濁程度相一致。結(jié)論:(1)氧化損傷性白內(nèi)障模型適用于白內(nèi)障的試驗研究(2)AQPO與氧化損傷性白內(nèi)障的發(fā)病存在密切的關系。
[Abstract]:Objective: To explore the three dogs through the establishment of cataract model and compare the advantages and disadvantages of the three kinds of models, choose a cataract model as the experiment continued, and to detect the relationship between the expression of AQPO and the process of cataract development of the model, to explore the effect of AQPO on the formation of cataract. Methods: (1) 60 local average age around June hybrid dogs were randomly divided into 6 groups, respectively, oxidative damage of (Fenton) cataract model group, diabetic cataract model group (STZ), selenium (sodium selenite) cataract model group and the model control group, 10 rats in each group. Daily with slit lamp microscope and photographed, according to the LOCS classification standard III records the lens structure changes and classification. (2) a total of 40 local hybrid dogs were randomly divided into 2 groups, divided into model group and control group, 20 rats in each group were graded according to the grading standard of LOCS III formation process of cataract, and the formation of each level in the model group 鏃墮棿鑺傜偣涓婁嬌鐢≧T-PCR鏂規(guī)硶媯,

本文編號:1737540

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