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雙重PCR檢測奶牛隱性乳房炎大腸桿菌與無乳鏈球菌方法的建立及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2018-04-04 19:10

  本文選題:大腸桿菌 切入點(diǎn):無乳鏈球菌 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年10期


【摘要】:為快速檢測奶牛隱性乳房炎主要致病菌大腸桿菌和無乳鏈球菌,分別針對2種致病菌16S-23S rRNA和16S rRNA基因設(shè)計(jì)2對特異性引物,優(yōu)化并確立雙重PCR反應(yīng)體系。特異性檢測表明,對其他對照菌株未擴(kuò)增出目的條帶;敏感性試驗(yàn)表明,該雙重PCR對大腸桿菌、無乳鏈球菌的最小檢測濃度分別為10~2、10~3cfu/mL。同時(shí)采用雙重PCR與細(xì)菌學(xué)檢查法對送檢的96份奶樣進(jìn)行檢測,結(jié)果雙重PCR檢出63份大腸桿菌陽性、54份鏈球菌陽性;細(xì)菌學(xué)方法檢出29份大腸桿菌陽性、37份鏈球菌陽性。說明本研究建立的雙重PCR方法敏感、快速,可用于檢測大腸桿菌和無乳鏈球菌引起的奶牛隱性乳房炎。
[Abstract]:For the rapid detection of mastitis pathogenic bacteria Escherichia coli and Streptococcus agalactiae, 2 specific pairs of primers were designed according to 2 kinds of pathogenic bacteria 16S-23S rRNA and 16S rRNA gene respectively, optimize and establish double PCR reaction system. The specific detection results showed that, the other control strains without amplification purpose bands; sensitivity test showed that the double PCR of Escherichia coli, the minimum detectable concentration of Streptococcus agalactiae were 10~2,10~3cfu/mL. and double PCR and bacteriological examination method for the submission of 96 milk samples were detected. Results 63 samples were positive for Escherichia coli PCR double detection, 54 Streptococcus positive bacteriological methods; 29 positive samples of Escherichia coli, 37 Streptococcus. Double PCR method established in this study is sensitive, rapid, and can be used for detection of Escherichia coli and mastitis caused by Streptococcus lactis.

【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動物科技學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:吉林省科技廳重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(20150204024NY) 吉林省教育廳項(xiàng)目(吉教科合字[2016]第205號) 國家級大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目(201611439025) 吉林省大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目(2016064) 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院重點(diǎn)學(xué)科項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字[2015]第X50號)
【分類號】:S858.23

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本文編號:1711294

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