免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜篩選綿羊BMPR-1B互作蛋白的研究
本文選題:BMPR-B 切入點:真核表達 出處:《家畜生態(tài)學報》2017年03期
【摘要】:為研究與綿羊骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B(BMPR-1B)相互作用的蛋白,試驗通過構(gòu)建的pcDNA3.1a-BMPR-1B真核表達載體并在Sf9昆蟲細胞中特異性表達,采用免疫共沉淀的方法富集綿羊卵巢中與BMPR-1B蛋白的結(jié)合蛋白,SDS-PAGE凝膠電泳分離免疫共沉淀復合物,MALDI-TOF/TOF結(jié)合數(shù)據(jù)庫檢索方法篩選鑒定與BMPR-1B相互作用蛋白。結(jié)果表明,試驗獲得的GDF5、BMP2、BMP4、RhoD和HSP 10蛋白與BMPR-1B互作,GDF5和BMP4作為BMPR-1B蛋白的配體來發(fā)揮其生物學功能,BMP2、RhoD和HSP 10在卵泡發(fā)育上起重要作用。RhoD和HSP 10與棉羊繁殖主效基因相關(guān)聯(lián)。研究結(jié)果為進一步研究BMPR-1B的功能和研究BMPR-1B作為綿羊高繁主效基因的機理和分子調(diào)控機制提供了新的思路與方法。
[Abstract]:In order to study the protein interacting with sheep bone morphogenetic protein receptor 1BMP BM-1B, the eukaryotic expression vector of pcDNA3.1a-BMPR-1B was constructed and expressed specifically in Sf9 insect cells.SDS-PAGE gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used to isolate the MALDI-TOF / TOF binding database from sheep ovaries by immunoprecipitation method for screening and identification of BMPR-1B interacting proteins.The results showed that GDF5, BMP2, BMP4, RhoD and HSP 10 proteins interacted with BMPR-1B as ligands of BMPR-1B protein to play their biological functions. Rod D and HSP 10 played an important role in follicular development. RhoD and HSP 10 were associated with major reproductive genes of cotton sheep.The results provided a new idea and method for further study on the function of BMPR-1B and the mechanism and molecular regulation mechanism of BMPR-1B as the main gene of sheep high propagation.
【作者單位】: 青海大學農(nóng)牧學院;西北農(nóng)林科技大學動物科技學院;甘肅農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院;
【基金】:青海省科技計劃項目(2016-ZJ-935Q) 國家自然科學基金(31260547)
【分類號】:S826
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,本文編號:1687902
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