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免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜篩選綿羊BMPR-1B互作蛋白的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-30 22:18

  本文選題:BMPR-B 切入點(diǎn):真核表達(dá) 出處:《家畜生態(tài)學(xué)報(bào)》2017年03期


【摘要】:為研究與綿羊骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B(BMPR-1B)相互作用的蛋白,試驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建的pcDNA3.1a-BMPR-1B真核表達(dá)載體并在Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞中特異性表達(dá),采用免疫共沉淀的方法富集綿羊卵巢中與BMPR-1B蛋白的結(jié)合蛋白,SDS-PAGE凝膠電泳分離免疫共沉淀復(fù)合物,MALDI-TOF/TOF結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)檢索方法篩選鑒定與BMPR-1B相互作用蛋白。結(jié)果表明,試驗(yàn)獲得的GDF5、BMP2、BMP4、RhoD和HSP 10蛋白與BMPR-1B互作,GDF5和BMP4作為BMPR-1B蛋白的配體來(lái)發(fā)揮其生物學(xué)功能,BMP2、RhoD和HSP 10在卵泡發(fā)育上起重要作用。RhoD和HSP 10與棉羊繁殖主效基因相關(guān)聯(lián)。研究結(jié)果為進(jìn)一步研究BMPR-1B的功能和研究BMPR-1B作為綿羊高繁主效基因的機(jī)理和分子調(diào)控機(jī)制提供了新的思路與方法。
[Abstract]:In order to study the protein interacting with sheep bone morphogenetic protein receptor 1BMP BM-1B, the eukaryotic expression vector of pcDNA3.1a-BMPR-1B was constructed and expressed specifically in Sf9 insect cells.SDS-PAGE gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used to isolate the MALDI-TOF / TOF binding database from sheep ovaries by immunoprecipitation method for screening and identification of BMPR-1B interacting proteins.The results showed that GDF5, BMP2, BMP4, RhoD and HSP 10 proteins interacted with BMPR-1B as ligands of BMPR-1B protein to play their biological functions. Rod D and HSP 10 played an important role in follicular development. RhoD and HSP 10 were associated with major reproductive genes of cotton sheep.The results provided a new idea and method for further study on the function of BMPR-1B and the mechanism and molecular regulation mechanism of BMPR-1B as the main gene of sheep high propagation.
【作者單位】: 青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院;西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】:青海省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2016-ZJ-935Q) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31260547)
【分類號(hào)】:S826

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1687902

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