本文選題：Oct　切入點：牦牛　出處：《畜牧獸醫(yī)學(xué)報》2017年03期

【摘要】：旨在通過檢測轉(zhuǎn)錄因子Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4)在牦牛(Bos grunneins)卵母細(xì)胞成熟及早期胚胎發(fā)育過程中的表達(dá),分析Oct 4在卵母細(xì)胞與體外受精胚胎發(fā)育過程中的作用。本研究收集牦牛卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(Cumulus-oocyte complexes,COCs)對其進行體外成熟培養(yǎng),生產(chǎn)體外受精(In vitro fertilization,IVF)胚胎,評估各時期胚胎發(fā)育能力。采用實時熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和間接免疫熒光染色方法從基因和蛋白水平檢測COCs和胚胎各時期Oct 4的表達(dá)與分布。結(jié)果表明,1)2~4-細(xì)胞胚胎、5~8-細(xì)胞胚胎、9~16-細(xì)胞胚胎和囊胚的發(fā)育率分別為(64.66±1.76)%、(43.33±1.76)%、(24.66±2.40)%和(9.33±0.67)%。2)COCs和胚胎各發(fā)育時期均可檢測到Oct 4基因,其中9~16-細(xì)胞胚胎表達(dá)最高,依次為囊胚、2~4-細(xì)胞胚胎和5~8-細(xì)胞胚胎,未成熟COCs和成熟COCs中表達(dá)最低。3)免疫熒光染色結(jié)果顯示,OCT 4蛋白主要分布在COCs和體外受精胚胎的細(xì)胞質(zhì)中,在細(xì)胞核中表達(dá)較弱。免疫熒光IOD值分析可得,9~16-細(xì)胞胚胎IOD值最高,依次為囊胚、2~4-細(xì)胞胚胎,5~8-細(xì)胞胚胎最低。綜上表明,Oct 4在牦牛卵母細(xì)胞和早期胚胎發(fā)育過程中的各個時期均有表達(dá),且不同時期該基因的表達(dá)量存在差異。由此說明Oct 4在9~16-細(xì)胞胚胎時期可能參與胚胎合子型基因轉(zhuǎn)錄激活的調(diào)控過程,在囊胚時期可能參與維持內(nèi)細(xì)胞團全能性的過程。
[Abstract]:The aim of this study was to detect the expression of Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4 in the maturation and early embryo development of Bos grunneinsoocytes, and to analyze the role of Oct 4 in the development of oocytes and embryos during in vitro fertilization.In this study, yak cumulus-oocyte complexes (Cumulus-oocyte complex COCs) were collected and cultured in vitro to produce in vitro fertilization (IVF) embryos and to evaluate the development ability of embryos.The expression and distribution of COCs and Oct 4 were detected at gene and protein levels by real-time fluorescence quantitative PCR(Quantitative real-time PCR qRT-PCR and indirect immunofluorescence staining.Immunofluorescence IOD analysis showed that the highest IOD value was found in the 16-cell blastocyst embryos, followed by the lowest IOD values in the blastocyst embryos and the blastocyst 4- cell embryos.The results showed that Oct4 was expressed in yak oocytes and early embryos at all stages, and the expression of Oct4 was different in different stages.It is suggested that Oct _ 4 may be involved in the regulation of zygote type gene transcriptional activation at the embryo stage and in the blastocyst stage during the blastocyst stage.
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院甘肅省牛羊胚胎工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31272616;31472244)
【分類號】：S823.85

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6 印惠s，

本文編號：1686687