Taqman-MGB探針法檢測炭疽桿菌
本文選題:炭疽桿菌 切入點:Taqman-MGB法 出處:《中國獸醫(yī)學(xué)報》2016年11期
【摘要】:根據(jù)GenBank中炭疽桿菌的主基因組上gyrA基因,毒力因子px01上pagA基因和侵襲因子px02上的CapA基因分別設(shè)計引物和對應(yīng)Taqman-MGB探針,建立了檢測炭疽桿菌的實時定量PCR方法。該方法具有良好特異性,僅對炭疽桿菌檢測結(jié)果為陽性,而與蠟樣芽孢桿菌、蘇云金桿菌、巨大芽孢桿菌、沙門菌、大腸桿菌、鏈球菌、銅綠假單孢桿菌無交叉反應(yīng),檢測靈敏度最低可達(dá)100copies/μL。對24份皮毛盲樣和120份送檢樣品檢測結(jié)果表明建立的定量PCR方法與商業(yè)化定量PCR試劑盒的符合率為100%。Taqman-MGB探針方法靈敏、特異、重復(fù)性好,可應(yīng)用于炭疽桿菌的快速診斷與監(jiān)測。
[Abstract]:Primers and corresponding Taqman-MGB probes were designed according to the gyrA gene on the main genome of Bacillus anthracis in GenBank, the pagA gene on the virulence factor px01 and the CapA gene on the invasive factor px02. A real-time quantitative PCR method for the detection of Bacillus anthracis was established. The method has good specificity and is positive only for Bacillus anthracis, Bacillus thuringiensis, Bacillus megaterium, Salmonella, Escherichia coli, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, Bacillus cereus, E. coli, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis. Streptococcus, Pseudomonas aeruginosa, no cross reaction, The detection sensitivity was the lowest up to 100copies/ 渭 L. the results showed that the coincidence rate between the established quantitative PCR method and the commercial quantitative PCR kit was that the 100%.Taqman-MGB probe method was sensitive, specific and reproducible. It can be used in rapid diagnosis and monitoring of Bacillus anthracis.
【作者單位】: 河南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心;河南農(nóng)業(yè)大學(xué);
【基金】:河南省科技攻關(guān)項目(102102110129)
【分類號】:S852.616
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,本文編號:1682407
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