本文選題：硼　切入點(diǎn)：豬卵泡顆粒細(xì)胞　出處：《安徽科技學(xué)院》2017年碩士論文

【摘要】：為探究硼對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞的影響及其應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)以提高動(dòng)物繁殖性能的可能性。本研究首先選用性成熟健康母豬卵巢,分離培養(yǎng)卵泡顆粒細(xì)胞,CCK-8毒性試驗(yàn)初步確定體外硼添加梯度為0、0.5、1.0、5.0、40和80 mmol/L。然后分別通過(guò)HE染色、流式細(xì)胞術(shù)、Western Blot、免疫熒光等方法進(jìn)行細(xì)胞鑒定和相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。其次,試驗(yàn)選用96只健康性成熟小鼠,隨機(jī)分為4組,飲水中硼添加量分別為0、5、10、20 mg/L,飼喂30 d后人工配種,分別于妊娠0d、14 d每組隨機(jī)選取小鼠8只,處死后立即解剖取卵巢、子宮,稱重,多聚甲醛固定;每組余下8只小鼠飼喂至產(chǎn)仔,觀察并檢測(cè)繁殖性能相關(guān)指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果如下:1、硼對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響:與0 mmol/L硼處理組相比較,0.5 mmol/L硼處理組豬卵泡顆粒細(xì)胞正常細(xì)胞比率升高5.3%,凋亡細(xì)胞比率降低5.7%;5.0、40和80 mmol/L硼處理組正常細(xì)胞比率分別降低6.7%、14.45%、15.01%,凋亡細(xì)胞比率分別增加5.7%、11.6%、14.8%。2、硼對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞周期的影響:與0mmol/L硼處理組相比較,0.5和5.0 mmol/L硼處理組G1/G0細(xì)胞數(shù)降低,細(xì)胞比率分別降低3.77%和2.72%,G2/M期細(xì)胞比率及細(xì)胞增殖指數(shù)升高,G2/M期細(xì)胞比率分別升高1.13%、1.57%,細(xì)胞增殖指數(shù)分別升高1.75%、2.63%;1.0 mmol/L硼處理組G1/G0細(xì)胞比率降低10.48%,S期細(xì)胞比率及細(xì)胞增殖指數(shù)分別升高5.65%、4.53%;40 mmol/L硼處理組G2/M細(xì)胞比率及細(xì)胞增殖指數(shù)分別降低4.39%、2.97%;80 mmol/L硼處理組G1/G0細(xì)胞比率升高6.65%,S期、細(xì)胞比率、G2/M細(xì)胞比率及細(xì)胞增殖指數(shù)分別降低 3.93%、5.5%、9.43%。3、硼對(duì)G-1和G-15處理的豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響:與不用G-1與G-15處理組相似,低濃度硼對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡有抑制作用,高濃度硼(硼添加量高于5.0mmol/L)則有促進(jìn)作用,細(xì)胞死亡數(shù)增多。G-1處理組凋亡細(xì)胞比率均低于非處理組,表明G-1對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡有抑制作用;G-15處理組凋亡細(xì)胞比率皆高于非處理組,表明G-15對(duì)豬卵泡顆粒細(xì)胞凋亡有促進(jìn)作用。4、硼對(duì)G-1和G-15處理的豬卵泡顆粒細(xì)胞周期的影響:與不用G-1與G-15處理組相似,低濃度硼對(duì)G-1和G-15處理的卵泡顆粒細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用,硼添加濃度高于5.0 mmol/L時(shí),對(duì)卵泡顆粒細(xì)胞增殖有抑制作用。與未添加G-1試驗(yàn)相比較,添加G-1處理組的S期細(xì)胞數(shù)及比率普遍降低。與未添加G-15試驗(yàn)相比較,G-15處理的低濃度硼組S期細(xì)胞數(shù)及比率降低,G2/M細(xì)胞數(shù)比率升高。5、硼對(duì)小鼠繁殖性能的影響:與同日齡0mg/L硼添加組相比較,5、10和20 mg/L硼添加組小鼠胎產(chǎn)仔數(shù)分別顯著升高3.83、3.16、4.33只(P0.05),初生重分別顯著降低0.26、0.44、0.46 g(P0.05);小鼠初生窩重變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6、硼對(duì)小鼠卵巢組織結(jié)構(gòu)的影響:與同日齡0mg/L硼添加組比較,妊娠7 d時(shí)卵巢皮質(zhì)內(nèi)卵泡數(shù)隨硼添加量增加呈現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì),10和20 mg/L硼添加組卵泡數(shù)顯著升高(P0.05),原始卵泡減少,次級(jí)卵泡數(shù)量增多,初級(jí)卵母細(xì)胞核大而圓,可見少量閉鎖卵泡;5、10和20 mg/L硼添加組卵巢指數(shù)隨硼添加量增加呈現(xiàn)降低趨勢(shì),但差異不顯著(P0.05);妊娠14d時(shí),卵巢皮質(zhì)內(nèi)各級(jí)卵泡結(jié)構(gòu)正常,次級(jí)卵泡數(shù)量增多,10 mg/L硼添加組卵泡數(shù)有所增加,但差異不顯著(P0.05),20 mg/L硼添加組卵泡數(shù)顯著降低(P0.05),閉鎖卵泡數(shù)較妊娠7 d明顯增加;5、10和20 mg/L硼添加組卵巢指數(shù)隨硼添加量增加呈現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7、硼對(duì)小鼠子宮組織結(jié)構(gòu)的影響:各處理組子宮結(jié)構(gòu)層次分明,未見明顯病理性變化。與同日齡0 mg/L硼添加組相比較,妊娠7 d時(shí),5、10和20 mg/L硼添加組子宮指數(shù)有所升高,但差異不顯著(P0.05);5和20 mg/L硼添加組子宮壁厚度顯著升高(P0.05);妊娠14 d時(shí),子宮指數(shù)明顯高于妊娠7 d,5、10和20mg/L硼添加組子宮指數(shù)顯著升高(P0.05),5mg/L硼添加組子宮壁厚度顯著升高(P0.05),20 mg/L硼添加組子宮壁厚度顯著降低(P0.05);妊娠14 d子宮內(nèi)膜較厚,且均明顯高于妊娠7 d的子宮壁厚度。綜上所述,低劑量硼(≤5.0 mmol/L硼)可調(diào)節(jié)體外培養(yǎng)豬卵泡顆粒細(xì)胞周期,促進(jìn)卵泡顆粒細(xì)胞增殖能力;高劑量硼(≥5.0 mmol/L硼)則可加速卵泡顆粒細(xì)胞的凋亡,并表現(xiàn)出明顯劑量依賴性。GPR30激動(dòng)劑G-1組細(xì)胞凋亡呈緩解趨勢(shì),增殖系數(shù)呈升高趨勢(shì);GPR30特異性阻斷劑G-15組細(xì)胞凋亡呈增強(qiáng)趨勢(shì),增殖系數(shù)呈降低趨勢(shì),表明硼可通過(guò)GPR30-GPER1通路來(lái)調(diào)控卵泡顆粒細(xì)胞的增殖與凋亡。5-20 mg/L飲水硼提高小鼠胎產(chǎn)仔數(shù),降低初生重,但對(duì)初生窩重、卵巢和子宮指數(shù)無(wú)明顯影響;5、10 mg/L飲水硼促進(jìn)各級(jí)卵泡數(shù)增加,改善卵巢皮質(zhì)內(nèi)卵泡及子宮腺發(fā)育,其中以添加5mg/L硼效果最為明顯;妊娠14d時(shí)子宮指數(shù)和子宮壁厚度明顯高于妊娠7 d。
[Abstract]:In order to explore the effect of boron on porcine follicular granular cells and its application in animal production to improve the reproductive performance of pigs . The results were as follows : 1 . The effects of boron on the apoptosis of porcine follicular granulose cells were determined by HE staining , flow cytometry , Western Blot and immunofluorescence . The results were as follows : 1 . The percentage of normal cells in the treated group was decreased by 5.7 % , 14.45 % , 14.8 % , respectively . The percentage of G1 / G0 cells increased by 5.65 % , 4.53 % , 9.43 % and 3.93 % , 4.53 % and 9.43 % respectively . The number of follicles in the ovary cortex increased significantly ( P0.05 ) , the number of follicles in the ovarian cortex increased significantly ( P0.05 ) , the number of follicles in the 5 , 10 and 20 mg / L boron groups increased significantly ( P0.05 ) , the number of follicles in the 5 , 10 and 20 mg / L boron groups increased significantly ( P0.05 ) . The results showed that boron could regulate the proliferation and apoptosis of the follicle cells through the GPER1 pathway . 5 - 20 mg / L boron could increase the litter size and reduce the initial weight , but it had no obvious effect on the primary nest weight , ovary and uterus index ; 5 , 10 mg / L water boron promoted the growth of follicles in the ovary cortex and the uterine gland development .

【學(xué)位授予單位】：安徽科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S814

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1678524