本文選題：豬流行性腹瀉病毒　切入點：RT-LAMP　出處：《中國獸醫(yī)學(xué)報》2017年07期

【摘要】：針對豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的M基因設(shè)計LAMP引物,對反應(yīng)體系的條件優(yōu)化并進行特異性及敏感性等試驗。結(jié)果顯示:該方法在60℃下恒溫擴增60min,使PEDV的M基因得到了高效率特異性擴增。本試驗方法特異性好,與豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRSSV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬細(xì)小病毒(PPV)及豬偽狂犬病病毒(PRV)等無交叉反應(yīng),同時也具有較好的靈敏性,最低檢測分子拷貝數(shù)為1.0×102 copies/μL。反應(yīng)結(jié)束后加入SYBR GreenⅠ在紫外燈下觀察顏色變化,結(jié)果顯示陽性擴增產(chǎn)物呈現(xiàn)綠色熒光。結(jié)果表明:該LAMP檢測方法特異性強,靈敏度高,操作便捷,適于臨床檢測PEDV。
[Abstract]:The porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) M gene LAMP primers were designed on the reaction system and conditions were optimized specificity and sensitivity tests. The results show that the method of constant temperature at 60 DEG C of 60min amplification, M gene PEDV was amplified. The efficiency test method with good specificity. Classical swine fever virus (CSFV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRSSV), porcine circovirus type 2 (PCV-2), porcine parvovirus (PPV) and pseudorabies virus (PRV) and no cross reaction, but also has good sensitivity, lowest molecular detection of copy number after joining SYBR Green I observed the color change in the UV lamp is 1 x 102 copies/ L. reaction, the results showed that the positive PCR products showed green fluorescence. The results show that the LAMP method has strong specificity, high sensitivity, convenient operation, suitable for clinical detection of PEDV.

【作者單位】： 貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;貴州省動物疫病預(yù)防控制中心;貴州省貴陽市農(nóng)業(yè)委員會;貴州省生豬質(zhì)量安全工程技術(shù)研究中心;貴州省畜禽遺傳資源管理站;
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)資助項目(黔科合NY[2015]3009-1號) 貴州省生豬質(zhì)量安全工程技術(shù)研究中心建設(shè)資助項目(黔科合農(nóng)C字[2011]4022號) 貴州省動物疫病防控與獸醫(yī)公共衛(wèi)生保障科技創(chuàng)新人才團隊資助項目(黔科合人才團隊[2015]4016號) 貴州省農(nóng)業(yè)委員會科技計劃資助項目(2015-01號)
【分類號】：S852.651

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本文編號：1656093