本文選題：HN亞型禽流感病毒　切入點(diǎn)：HA蛋白　出處：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年03期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：為了獲得具有良好免疫活性的H9N2亞型禽流感病毒HA蛋白,本研究利用Bac-to-Bac昆蟲(chóng)-桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)對(duì)H9N2亞型禽流感病毒HA蛋白進(jìn)行表達(dá)。運(yùn)用PCR對(duì)H9N2亞型禽流感病毒HA基因進(jìn)行擴(kuò)增,將HA基因連接于轉(zhuǎn)移載體pFastBacDual的BamHⅠ和HindⅢ兩個(gè)酶切位點(diǎn)之間,構(gòu)成pFastBacDual-HA重組載體;將pFastBacDual-HA轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞,利用藍(lán)白斑篩選法和PCR方法對(duì)陽(yáng)性菌落篩選重組桿粒Bacmid-HA;重組桿粒Bacmid-HA對(duì)Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)行了轉(zhuǎn)染,獲得重組桿狀病毒rBV-HA;運(yùn)用SDS-PAGE電泳和Western blotting分析rBV-HA感染的細(xì)胞和細(xì)胞上清。結(jié)果表明,重組HA蛋白大小約為65 kD;Western blotting分析顯示,HA蛋白與免疫H9N2禽流感病毒后獲得的陽(yáng)性血清具有良好的特異性反應(yīng),為進(jìn)一步研制針對(duì)HA蛋白的H9N2亞型AIV亞單位疫苗和研發(fā)H9亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to obtain HA protein of H9N2 subtype avian influenza virus with good immune activity, In this study, Bac-to-Bac insect-baculovirus expression system was used to express HA protein of H9N2 subtype avian influenza virus, and PCR was used to amplify HA gene of H9N2 subtype avian influenza virus. The HA gene was ligated between the BamH 鈪，

本文編號(hào)：1634399