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絨山羊皮膚毛囊miR-1298-5P靶基因預(yù)測及表達載體構(gòu)建

發(fā)布時間:2018-02-28 22:21

  本文關(guān)鍵詞: 遼寧絨山羊 皮膚毛囊 miR--P FgF 靶基因預(yù)測 表達載體構(gòu)建 出處:《中國畜牧雜志》2017年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:探討遼寧絨山羊皮膚毛囊不同發(fā)育時期miR-1298-5P的調(diào)控作用及其與靶基因的潛在關(guān)系,為miR-1298-5P與其靶基因?qū)ζつw毛囊發(fā)育作用提供理論依據(jù)。以遼寧絨山羊皮膚毛囊組織為材料,通過miRNA的分離、表達、靶基因預(yù)測篩選表達及靶位點3'UTR表達載體構(gòu)建,采用RT-PCR進行表達檢測,用生物信息學(xué)方法預(yù)測miR-1298-5P的靶基因,并對其靶基因Fg F2的靶位點進行克隆測序、缺失突變。miR-1298-5P及其靶基因在皮膚毛囊不同發(fā)育時期均呈現(xiàn)差異性表達,二者之間呈現(xiàn)一種負調(diào)控趨勢,其可能對皮膚毛囊周期性發(fā)育起到一定的調(diào)控作用。靶基因預(yù)測發(fā)現(xiàn)Fg F2的3'UTR存在mi R-1298-5P種子區(qū)結(jié)合位點,并成功構(gòu)建了Fg F2 3'UTR表達載體,該載體的成功構(gòu)建為后期過表達轉(zhuǎn)染體系的建立和功能基因的驗證奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:To investigate the regulation of miR-1298-5P and its potential relationship with target gene in Liaoning cashmere goat skin follicle at different developmental stages, and to provide a theoretical basis for the effect of miR-1298-5P and its target gene on the development of skin hair follicle. The skin hair follicle tissue of Liaoning cashmere goat was used as the material. Through the isolation, expression, target gene prediction, screening and expression of miRNA and the construction of target 3UTR expression vector, the target gene of miR-1298-5P was detected by RT-PCR, the target gene of miR-1298-5P was predicted by bioinformatics, and the target of FgF2 was cloned and sequenced. The deletion mutation. MiR-1298-5P and its target gene showed different expression at different stages of skin hair follicle development, and there was a trend of negative regulation between them. It may play a role in regulating the periodic development of skin hair follicles. The target gene predicted that the 3UTR of FgF2 had a seed region binding site of mi R-1298-5P, and successfully constructed the expression vector FgF23 UTR. The successful construction of the vector laid a foundation for the establishment of the late overexpression transfection system and the verification of functional genes.
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;長春科技學(xué)院;
【基金】:吉林省科技發(fā)展計劃項目(20150236) 吉林省教育廳項目(2015566)
【分類號】:S827

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本文編號:1549230

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