本文關(guān)鍵詞： 藍(lán)舌病病毒型 VP蛋白 單克隆抗體 抗原表位　出處：《生物工程學(xué)報(bào)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為研究本實(shí)驗(yàn)室制備的一株抗藍(lán)舌病病毒8型(BTV-8)VP2蛋白的單克隆抗體(MAb)3G11識(shí)別的B細(xì)胞抗原表位,利用噬菌體肽庫展示技術(shù)對3G11識(shí)別的抗原表位進(jìn)行篩選并鑒定。經(jīng)過4輪淘選后挑取藍(lán)斑測序,測序結(jié)果經(jīng)分析后獲得KLLAT序列,與BTV-8 VP2蛋白氨基酸序列比對后獲得共同的短肽序列為283LL284;合成4種短肽序列:KLLAA、KALAT、KLAAT和KLLAT,與3G11細(xì)胞上清和腹水分別進(jìn)行間接ELISA鑒定,結(jié)果表明,短肽KLLAA和KLLAT與3G11細(xì)胞上清及腹水具有較強(qiáng)的結(jié)合能力;與24種BTV標(biāo)準(zhǔn)陽性血清反應(yīng)結(jié)果表明,這兩種短肽都可與BTV-8陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng);序列分析結(jié)果可見,該表位的氨基酸序列283LL284在不同來源的BTV-8毒株間保守,確定283LL284為MAb3G11識(shí)別抗原表位的關(guān)鍵氨基酸。本研究為建立8型BTV特異性的免疫學(xué)檢測方法和相關(guān)病毒蛋白的功能研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the B cell epitopes recognized by MAb3G11, a monoclonal antibody against the blue tongue virus type 8 (BTV-8) VP2 protein was prepared in our laboratory. The antigenic epitopes recognized by 3G11 were screened and identified by phage display technique. After 4 rounds of panning, the locus coeruleus was sequenced, and the KLLAT sequence was obtained after analysis. A common short peptide sequence of 283LL284was obtained after alignment with the amino acid sequence of BTV-8 VP2 protein. Four short peptide sequences: KLLAAK ALATATAT KLAAT and KLLATT were synthesized and identified with 3G11 cell supernatant and ascites by indirect ELISA. Short peptide KLLAA and KLLAT have strong binding ability to 3G11 cell supernatant and ascites, and the results of reaction with 24 kinds of BTV standard positive serum show that both short peptides can react specifically with BTV-8 positive serum. The amino acid sequence of the epitope 283LL284 was conserved among BTV-8 strains from different sources. 283LL284 was identified as the key amino acid of MAb3G11 to recognize antigenic epitopes. This study laid a foundation for the establishment of a specific immunological detection method for type 8 BTV and the functional study of related viral proteins.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】：“十二五”國家科技支撐計(jì)劃(No.2013BAD12B01)資助~~
【分類號(hào)】：S852.65

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