發(fā)布時間：2018-02-24 09:18

  本文關(guān)鍵詞： 禽致病性大腸桿菌 O血清型 O78 毒力基因 致病性　出處：《揚州大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：禽致病性大腸桿菌引起禽類的大腸桿菌病,包括心包炎、肝周炎、氣囊炎、呼吸道疾病和敗血癥等,給全世界各國的養(yǎng)禽業(yè)都帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了對禽致病性大腸桿菌的流行情況及發(fā)病情況進(jìn)行監(jiān)控以便給養(yǎng)禽業(yè)降低經(jīng)濟(jì)損失,我們從2013年1月份到2014年12月份在江蘇省的南通市、鹽城市、常州市、淮安市及山東省青島市的規(guī)模化養(yǎng)殖場及小型養(yǎng)殖戶中有大腸桿菌病癥狀的肉雞中進(jìn)了禽致病性大腸桿菌的分離。本次分離禽致病性大腸桿菌的肉雞,日齡在1日齡到32日齡之間。通過相關(guān)生化鑒定,共分離及鑒定出禽致病性大腸桿菌203株,其中以江蘇省的南通地區(qū)和山東省的青島地區(qū)為主,分別為96株和97株,其他市區(qū)共10株。通過玻板凝集和試管凝集試驗測定禽致病性大腸桿菌的O血清型,共測出159個分離株的O血清型,未定型的菌株44株。其中O血清型主要以O(shè)78、O45、O1、O142、 o65、O24、O161等O血清型為主,約占定型菌株的63.5%,除此之外還涉及很多其他的O血清型。本次分離結(jié)果顯示不同地區(qū)的O血清型的分布存在著差異,其中南通地區(qū)以O(shè)78、O45、O142、O161、O65、O24為主,共60株,共占南通地區(qū)定型菌株的75%,山東省青島地區(qū)O78、O1、O18、O161為主,共34株,占定型菌株的46.6%,其他地區(qū)以078為主。結(jié)果表明：不同地區(qū)禽致病性大腸桿菌的O血清型的流行存在著差異,但是不同地區(qū)都是以078為主要流行株,表明078是引起禽類大腸桿菌病的一個主要的原因。除了O血清型,同時對100株大腸桿菌的種系發(fā)生型進(jìn)行了檢測,其中A型菌株占30%、B1型菌株占31%、B2型菌株占2%、D型菌株占37%。對與禽致病性大腸桿菌的毒力密切相關(guān)的六個毒力基因進(jìn)行了檢測,包括Iss、iroN、tsh、cvaC、iutA、irp-2,檢出率分別為93.5%、73.1%、30.4%、37.2%、88.5%、34.6%,與國內(nèi)外結(jié)果基本一致。為了確定分離到的禽致病性大腸桿菌是否具有毒力以及毒力的強弱,我們選擇其中的以078及045等血清為主的46個分離株進(jìn)行了1日齡雛雞的致死性試驗,對1日齡雛雞采取左胸氣囊注射,107CFU的菌液進(jìn)行攻毒,結(jié)果表明大部分(63%)菌株具有高致病性。通過對O血清型的鑒定可知,078為本次主要的流行菌株,該血清型也是國內(nèi)外的流行血清型,為了了解078分離株的毒力之間差異及可能的原因,我們選取了不同地區(qū)的2個078分離株APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株進(jìn)行了種系發(fā)生分型、脈沖場凝膠電泳、LD50測定、35日齡的SPF雞及肉雞的體內(nèi)動態(tài)分布試驗并制作了相應(yīng)的病理切片,以觀察病理變化。種系發(fā)生分型表明兩個菌株分別屬于B1型和A型,脈沖場凝膠電泳結(jié)果表明兩株菌株之間存在著遺傳差異,APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株的LDso分別為108.5CFU、104.7CFU,通過35日齡SPF雞和肉雞采用左胸氣囊接種108CFU菌液,結(jié)果表明兩菌株均可以對35日齡SPF雞和肉雞造成感染,并且分析顯示兩株菌株之間存在著毒力的差異,通過對這兩株菌的毒力基因進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)APEC/QD/04分離株和APEC/HA/01分離株毒力基因存在差異,APEC/QD/04分離株比APEC/HA/01分離株毒力弱,APEC/QD/04分離株比APEC/HA/01分離株缺少tsh、cvaC、irp-2基因,這也許是兩個菌株之間致病性存在差異的一個原因。但是禽致病性大腸桿菌的致病機(jī)理比較復(fù)雜,影響菌株毒力的原因有很多,也有很多未知的毒力基因還有待進(jìn)一步的發(fā)現(xiàn)。通過兩個菌株的致病性試驗,表明APEC/QD/04分離株是一個中毒力的菌株,而APEC/HA/01分離株是一個強毒力菌株,這兩個菌株可以作為078血清型不同毒力的模式菌株。
[Abstract]:In order to reduce economic losses to poultry industry , there were only 96 strains and 97 strains isolated from poultry industry in Nantong , Jiangsu Province , O78 , O142 , O161 , O65 , O24 , O161 , O161 , O24 , O161 and other regions . In order to find out the difference between the virulence and virulence of the isolates , the results showed that there were genetic differences between two strains : Iss , iroN , tsh , cvaC , iutA and irp - 2 . however , that pathogenic mechanism of the pathogenic E . coli is complex , the cause of virulence of the strain is quite complex , and there are many unknown virulence genes .

【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61

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