本文關(guān)鍵詞： 奶牛乳腺上皮細(xì)胞 脂肪酸結(jié)合蛋白 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-c 乳脂　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：脂肪酸結(jié)合蛋白5(fatty acid binding protein 5,FABP5)是一種胞內(nèi)脂質(zhì)運(yùn)載體。本試驗(yàn)應(yīng)用甘油三酯測定法及BODIPY染色法檢測奶牛乳腺上皮細(xì)胞(bovine mammary epithelial cell,BMEC)中甘油三酯及脂滴分泌情況,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blotting技術(shù)檢測BMECs中FABP5對固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)的表達(dá)影響。結(jié)果顯示,試驗(yàn)成功獲得高純度的BMECs,構(gòu)建了pGCMV-IRES-EGFP-FABP5真核表達(dá)載體,且與空白對照組和空載體組相比,FABP5過表達(dá)組的甘油三酯和脂滴分泌量極顯著增加(P0.01),同時(shí)SREBP-1c及靶基因FAS、ACC的表達(dá)量均極顯著增加(P0.01);試驗(yàn)成功篩選了FABP5siRNA1為最佳干擾片段,當(dāng)FABP5抑制時(shí),抑制組的甘油三酯、脂滴分泌量極顯著減少(P0.01),SREBP-1c、FAS、ACC的表達(dá)量均極顯著降低(P0.01)。表明FABP5可通過上調(diào)SREBP-1c的表達(dá)從而促進(jìn)BMEC中乳脂的合成。
[Abstract]:Fatty acid binding protein acid binding protein 5 (FABP5) is an intracellular liposome. Triglyceride and lipid droplet secretion in bovine mammary epithelial cells were detected by triglyceride assay and BODIPY staining. The effect of FABP5 on the expression of steroid regulatory element binding protein SREBP-1c in BMECs was detected by real-time fluorescence quantitative blotting. The results showed that high purity BMECs were obtained successfully and the eukaryotic expression vector of pGCMV-IRES-EGFP-FABP5 was constructed. Compared with the blank control group and empty vector group, the secretion of triglyceride and lipid droplets in the overexpression group of FABP5 was significantly increased, and the expression of SREBP-1c and FAS-ACC were significantly increased. The FABP5siRNA1 was selected as the best interfering fragment when FABP5 was inhibited. The secretion of triglyceride and lipid droplets significantly decreased the expression of SREBP-1FASA in BMEC. It was suggested that FABP5 could promote the synthesis of milk fat in BMEC by upregulating the expression of SREBP-1c.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(2013AA102504-03)
【分類號】：S823.91

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