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MTT法檢測大鼠外周血淋巴細胞增殖反應探討與應用

發(fā)布時間:2018-02-21 06:02

  本文關鍵詞: MTT法 淋巴細胞增殖 細胞免疫 出處:《中國農學通報》2016年26期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為了更精準簡捷地評價機體的細胞免疫狀態(tài),采用MTT比色分析法檢測大鼠外周血淋巴細胞的增殖能力,并對試驗的最適條件進行了探討,然后將該法應用到Transwell共培養(yǎng)體系中以評價H9N2AIV感染內皮細胞后對跨內皮淋巴細胞增殖能力的影響。結果表明:在96孔細胞培養(yǎng)板中接種密度為1.25×106個/m L的淋巴細胞于含10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)的最適時間為48 h。感染病毒后,跨內皮淋巴細胞的增殖明顯受抑制;內皮完整狀態(tài)下,淋巴細胞和病毒共孵育后,活病毒的量降低,而當內皮不存在或被病毒感染后,這一現(xiàn)象消失。結果證明作為機體細胞免疫功能評價指標之一的淋巴細胞增殖能力可采用改良后的MTT法檢測。
[Abstract]:In order to evaluate the cellular immune status more accurately and simply, the proliferative ability of peripheral blood lymphocytes in rats was detected by MTT colorimetric assay, and the optimum conditions of the test were discussed. Then the method was applied to the Transwell co-culture system to evaluate the effect of H9N2AIV infection on the proliferation of transendothelial lymphocytes. The results showed that lymphocytes with a density of 1.25 脳 106 / mL were inoculated in a 96-well cell culture plate. The optimal culture time in RPMI 1640 medium containing 10s was 48 h. The proliferation of transendothelial lymphocytes was obviously inhibited. When the endothelial cells were intact, the amount of live virus decreased after the lymphocytes were incubated with virus, but when the endothelial cells did not exist or were infected by the virus, The results showed that the lymphocyte proliferation ability, as one of the evaluation indexes of cellular immune function, could be detected by improved MTT method.
【作者單位】: 北京農學院動物科學技術學院/獸醫(yī)學(中醫(yī)藥)北京市重點實驗室;中國農業(yè)大學動物醫(yī)學院;
【基金】:國家自然科學基金“抗菌中藥方劑清除感染細菌的新機制研究”(31272144)
【分類號】:S852.4

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號:1521205


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