本文關(guān)鍵詞： 布魯菌 構(gòu)建 表達(dá)綠色熒光　出處：《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了更直觀的觀察豬種布魯菌在宿主細(xì)胞/宿主體內(nèi)的活動(dòng)規(guī)律,本研究首先應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增pEGFP-N1質(zhì)粒的N1基因,與pMD18-T載體連接后,成功構(gòu)建PMD18-N1質(zhì)粒;進(jìn)而應(yīng)用XbalⅠ與SacⅡ限制性內(nèi)切酶,將PMD18-N1質(zhì)粒與pBBR1MCS-6質(zhì)粒分別進(jìn)行雙酶切,并將N1片段反向連接于PBBR1MCS-6載體上,經(jīng)菌液PCR鑒定與雙酶切鑒定,證明成功構(gòu)建了PBBR1MCS-N1質(zhì)粒;在此基礎(chǔ)上,將PBBR1MCS-N1質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化至豬種布魯菌感受態(tài)細(xì)胞,通過含氯霉素的TSA培養(yǎng)基篩選、PCR鑒定、熒光鑒定及菌株的傳代穩(wěn)定性試驗(yàn)與培養(yǎng)特性的觀察,最終獲得了可穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光的豬種布魯菌。
[Abstract]:In order to observe the activity regularity of the porcine Brutus in the host cell / host , we first applied the PCR technique to amplify the N1 gene , and then to construct the pMD18 - N1 plasmid . Then , the pMD18 - N1 plasmid was transformed into the plasmid pBBR1MCS - 6 by PCR . The results showed that the PBBR1MCS - N1 plasmid was transformed into the PBBR1MCS - 6 vector .

【作者單位】： 山東綠都生物科技有限公司;山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院;
【基金】：山東省自然資金項(xiàng)目(ZR2013CQ005)
【分類號(hào)】：S852.61

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1511232