本文關鍵詞： 鵝細小病毒 疫苗株 點突變 嵌合病毒 毒力　出處：《中國獸醫(yī)學報》2016年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了進一步明確各編碼蛋白基因在鵝細小病毒(goose parvovirus)鵝胚化疫苗株毒力減弱中的作用,以先前構建的弱毒疫苗株感染性質粒pSYG61v和強毒株感染性質粒pLH為基礎,通過重疊PCR方法,在pSYG61v和pLH質粒之間互換Rep1和VP1基因片段,獲得了6個嵌合質粒pSYG-vRep1、pSYG-vVP1、pSYG-vRC、pLH-aRep1、pLH-aVP1和pLH-aRC。將質粒以絨毛尿囊膜途徑轉染11日齡鵝胚分別拯救出嵌合病毒。嵌合病毒的雛鵝攻毒試驗表明,攜帶強毒株VP1基因的pSYG-vRC、pSYG-vVP1和pLH-aRep1這3個嵌合病毒對雛鵝表現(xiàn)出明顯致病性,死亡率在75.0%~87.5%。完全攜帶弱毒株rep-cap編碼框的pLH-aRC嵌合病毒攻毒組雛鵝無一死亡。攜帶強毒株Rep1基因的pLH-aVP1和pSYG-vRep1嵌合病毒攻毒組雛鵝也無一死亡,但在試驗期內(nèi)部分雛鵝明顯生長遲緩。嵌合病毒攻毒試驗結果表明,結構蛋白VP1基因的氨基酸點突變對GPV鵝胚化疫苗株的毒力減弱起著關鍵作用。
[Abstract]:In order to further clarify the role of various coding protein genes in the reduction of virulence of goose embryo vaccine strain of goose parvovirus, based on the previously constructed attenuated vaccine strain pSYG61v and virulence plasmid pLH of virulent strain, overlapping PCR method was used. Six chimeric plasmids pSYG-vRep1pSYG-vVP1npSYG-vRC+ pLH-aVP1 and pLH-aRCwere obtained by exchanging Rep1 and VP1 gene fragments between pSYG61v and pLH plasmids. Chorioallantoic membrane was used to transfect the plasmids into 11 day-old goose embryos to save chimeric viruses. Three chimeric viruses, pSYG-vRCU pSYG-vVP1 and pLH-aRep1, which carry the VP1 gene of virulent strain, showed obvious pathogenicity to goslings. The mortality rate was 75.0% and 87.5%. None of the goslings in the pLH-aRC chimeric virus attack group carrying the attenuated strain rep-cap coding frame had died, and none of the goslings in the pLH-aVP1 and pSYG-vRep1 chimeric virus groups carrying the Rep1 gene of the virulent strain had died. The results showed that the amino acid point mutation of structural protein VP1 gene played a key role in weakening the virulence of GPV goose embryo vaccine strain.
【作者單位】： 揚州大學獸醫(yī)學院江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31172317;31572511) 江蘇省高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目
【分類號】：S852.65

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本文編號：1502150