本文關(guān)鍵詞： 禽流感 H9N2 基因序列 抗原性 交叉免疫保護(hù)　出處：《南京農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：H9N2亞型禽流感自1994年首次在我國廣東地區(qū)發(fā)生以來,H9N2亞型禽流感廣泛流行于我國雞群中。隨著禽流感病毒抗原漂移和抗原突變的日積月累,使得禽類與人類之間的種屬屏障正在減弱或消失,對人類的公共衛(wèi)生安全存在巨大威脅。持續(xù)了解流感病毒的遺傳變異、不斷地評價病毒的抗原轉(zhuǎn)變,對于及時捕捉到可引起人類流感大流行的毒株,并研制有效疫苗具有非常重要的意義。為了解和監(jiān)測近年來H9N2亞型禽流感病毒的分子演化情況,選取2011-2012年所分離的14株H9N2亞型禽流感病毒,進(jìn)行全基因組的序列測定,應(yīng)用生物軟件分析基因序列和變異情況,揭示H9N2亞型禽流感病毒的流行規(guī)律。本研究結(jié)果表明,2011-2012年江浙部分地區(qū)分離的14株H9N2亞型禽流感病毒均具有低致病性禽流感病毒的分子特征。HA基因?qū)儆赮280-like亞分支,糖基化位點(diǎn)的缺失可能會引起病毒毒力的變化,大多數(shù)分離株的234位受體結(jié)合位點(diǎn)為L,呈現(xiàn)出與人流感受體結(jié)合的特性,表明近些年的H9N2亞型禽流感病毒已具備使哺乳動物致病的能力。NA基因?qū)儆赮280-like亞分支,分離株全部存在頸部缺失的現(xiàn)象。PA、PB1、NP基因全部屬于SH/F/98-like亞分支,與經(jīng)典毒株相比,多處位點(diǎn)氨基酸發(fā)生了變異。M基因?qū)儆贕l-like亞分支,均不具有對金剛烷胺類藥物的抗藥性。NS基因則分屬于兩個亞分支SH/F98-like和Y439-like,均具有能夠逃避干擾素IFN和腫瘤壞死因子TNF-a的抗病毒性,氨基酸也存在變異現(xiàn)象,兩個亞群的個別位點(diǎn)氨基酸出現(xiàn)明顯的差異。PB2基因則完全獨(dú)立形成一個新的亞分支。14株H9N2毒株的所有內(nèi)部基因的位點(diǎn)氨基酸變異現(xiàn)象與H7N9毒株相一致。對近幾年的H9N2亞型禽流感病毒監(jiān)測表明,病毒的抗原性發(fā)生了比較顯著的變化,有的是在疫苗的免疫壓力下出現(xiàn)了免疫逃避現(xiàn)象,導(dǎo)致免疫失敗的發(fā)生。本研究對14株H9N2亞型禽流感病毒的交叉免疫保護(hù)作用分析,結(jié)果表明,JS1102、ZJ1107、JS1109、JS1204的抗原性比較接近,HI抗體效價平均為81og2,4株病毒之間的交互HI值差異在3 log2左右,抗原相關(guān)值位于0.8～1之間;未免疫而攻毒的對照組5d時排毒的比例分別為5/5、5/5、4/5、4/5,免疫組在攻毒后5d時拭子樣品病毒分離均為陰性,毒株之間具有較好的免疫原性,彼此能夠產(chǎn)生很好的免疫保護(hù)效果。
[Abstract]:H9N2 subtype avian influenza (H9N2) has been widely prevalent in Chinese chickens since its first occurrence in Guangdong in 1994. With the accumulation of antigen drift and antigen mutation of avian influenza virus, H9N2 subtype avian influenza virus (H9N2) subtype avian influenza virus (H9N2) has been widely prevalent in Chinese chickens since 1994. Making the species barrier between birds and humans weakening or disappearing, posing a huge threat to human public health and safety. Keeping an understanding of the genetic variation of influenza viruses, constantly evaluating the antigenic changes of viruses, In order to understand and monitor the molecular evolution of H9N2 subtype avian influenza virus in recent years, it is of great significance to catch the virus that can cause the human influenza pandemic and to develop an effective vaccine. Fourteen strains of H9N2 subtype avian influenza virus isolated from 2011-2012 were selected and sequenced for the whole genome, and the gene sequence and variation were analyzed by biological software. The results showed that 14 strains of H9N2 subtype avian influenza virus isolated from Jiangsu and Zhejiang provinces from 2011 to 2012 all had the molecular characteristics of low pathogenic avian influenza virus. The HA gene belonged to Y280-like subbranch. The absence of glycosylation sites may lead to changes in virulence of the virus. The 234-site receptor binding site of most isolates is L, showing the characteristics of binding to human influenza receptors. These results indicate that the H9N2 subtype avian influenza virus has the ability to cause disease in mammals. Na gene belongs to Y280-like subbranch, and all the isolates have neck deletion. The NP gene belongs to the subbranch of SH/F/98-like, compared with the classical strain. The amino acids at many sites are mutated. M gene belongs to the subbranch of Gl-like. The NS gene belonged to two subbranches of SH/F98-like and Y439-like. Both of them had antiviral resistance to interferon IFN and tumor necrosis factor TNF-a, and the amino acids were also mutated. The amino acids of individual sites in the two subgroups were obviously different. PB2 gene was completely independent to form a new subbranch. 14 strains of H9N2 strain had the same amino acid variation in all internal genes as those of H7N9 strain. In recent years, the variation of amino acids in all internal genes of H9N2 strain was consistent with that of H7N9 strain. The H9N2 subtype avian influenza virus surveillance showed that, The antigenicity of the virus changed significantly, some of which appeared immune escape phenomenon under the immune pressure of the vaccine, which resulted in the immune failure. This study analyzed the cross-immunological protection of 14 strains of H9N2 subtype avian influenza virus. The results showed that the antigenicity of JS1102ZJ1107J1109 / JS1204 was close to the average HI antibody titer of 81og2 strain. The difference of HI value between the two strains was about 3 log2, and the antigenic correlation value was between 0.8 log2. The proportion of detoxification in the unimmunized control group was 5 / 5 / 5 / 5 / 5 / 5 / 5 / 5 / 5 respectively. The virus isolated from the swabs samples in the immunized group was negative at the 5th day after the attack, and there was good immunogenicity among the strains, which could produce a good immune protection effect.
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S855.3

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本文編號：1494098