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腸炎沙門菌sopE2基因缺失株的構建及其生物學活性的鑒定

發(fā)布時間:2018-01-29 20:13

  本文關鍵詞: 腸炎沙門菌 sopE 基因缺失 生物學活性鑒定 出處:《中國獸醫(yī)科學》2017年03期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為研究sopE 2基因?qū)δc炎沙門菌(Salm onella enteritidis)的生物學特性的影響及其與sopE功能差異,本研究以λ-Red介導的同源重組法構建了腸炎沙門菌C50336ΔsopE 2缺失株,并構建了以p BR322質(zhì)粒介導的sopE2基因回復株。測定了腸炎沙門菌野生株、sopE 2缺失株及其回復株的基本生物學特性,包括對人腸上皮細胞Caco-2 BBE及小鼠巨噬細胞RAW 264.7的黏附、侵襲能力及對小鼠的半數(shù)致死量。結果顯示,腸炎沙門菌sopE 2基因缺失對其生長、生化特性無影響;腸炎沙門菌C50336對Caco-2 BBE細胞的黏附率約為20%,侵襲率約為10%,對RAW264.7細胞的黏附率約為55%,侵襲率約為20%,sopE 2基因缺失對腸炎沙門菌C50336黏附能力無影響,侵襲能力有所下降,但無統(tǒng)計學差異;腸炎沙門菌C50336對小鼠的半數(shù)致死量為5.0×105CF U,sopE 2基因缺失株及回復株對小鼠的半數(shù)致死量均為3.2×105 CFU,表明sopE 2基因缺失對腸炎沙門菌的毒力無顯著影響。本研究為進一步探討sopE 2基因在腸炎沙門菌感染過程中的功能奠定了基礎。
[Abstract]:To study the effect of sopE 2 gene on the biological characteristics of Salm onella enteritidissis and its functional difference with sopE. In this study, Salmonella enteritidis C50336 螖 sopE 2 deletion strain was constructed by homologous recombination mediated by 位 -Red. The sopE2 gene response strain mediated by p BR322 plasmid was constructed, and the basic biological characteristics of the wild Salmonella enteritidis strain were determined. The adhesion, invasiveness and lethal dose to human intestinal epithelial cells (Caco-2 BBE) and mouse macrophages (RAW 264.7) were included. The absence of sopE 2 gene had no effect on the growth and biochemical characteristics of Salmonella enteritidis. The adhesion rate of Salmonella enteritidis C50336 to Caco-2 BBE cells was about 20, the invasion rate was about 10 and the adhesion rate to RAW264.7 cells was about 55%. The invasion rate was about 20% and the loss of sopE2 gene had no effect on the adhesion ability of Salmonella enteritidis C50336, but the invasive ability was decreased, but there was no statistical difference. The lethal dose of Salmonella enteritidis C50336 to mice was 5.0 脳 105 CF U. The median lethal dose of sopE 2 gene deletion strain and recovery strain to mice was 3.2 脳 10 5 CFU. The results showed that the absence of sopE 2 gene had no significant effect on the virulence of Salmonella enteritis. This study laid a foundation for further study of the function of sopE 2 gene in the process of Salmonella enteritis infection.
【作者單位】: 揚州大學江蘇省人獸共患病學重點實驗室江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家自然科學基金項目(31320103907) 江蘇省高校研究生科研創(chuàng)新計劃項目(KYZZ_0368)
【分類號】:S852.61
【正文快照】: 沙門菌為革蘭陰性、兼性厭氧胞內(nèi)寄生菌,可感染包括人在內(nèi)的多種宿主。沙門菌感染已成為一種重要的公共安全問題[1],在美國,沙門菌感染每年導致超過100萬人致病及約350人死亡[2]。在世界范圍內(nèi),沙門菌感染每年大約導致938萬人致病,155 000人死亡[3]。在過去20年中,盡管有各種

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