雞新城疫病毒、H9亞型禽流感病毒和禽肺炎病毒三重RT-PCR檢測方法的建立
本文關(guān)鍵詞: 雞新城疫病毒 H亞型禽流感病毒 禽肺炎病毒 三重RT-PCR 檢測 出處:《中國獸醫(yī)雜志》2017年02期 論文類型:期刊論文
【摘要】:本研究建立三重RT-PCR快速檢測鑒別雞新城疫病毒(NDV)、H9亞型禽流感病毒(AIV)和禽肺炎病毒(APV)的方法。根據(jù)Gen Bank中H9亞型AIV HA基因和雞NDV以及APV F基因的保守序列分別設(shè)計(jì)合成了三對特異性擴(kuò)增引物,通過優(yōu)化反應(yīng)條件建立了三重RT-PCR檢測鑒別雞NDV、H9亞型AIV和APV的方法。對該方法進(jìn)行特異性、敏感性和臨床樣品檢測。特異性試驗(yàn)結(jié)果顯示,所有參試的NDV、H9亞型AIV、APV分別擴(kuò)增出大小為247 bp、569 bp和424 bp的片段,而對照的其他毒株不擴(kuò)增;敏感性試驗(yàn)結(jié)果表明,本試驗(yàn)建立的方法能檢測到10 pg的各自RNA模板。檢測臨床樣品132份,NDV陽性26份,H9亞型AIV陽性6份,APV陽性2份,結(jié)果與病毒分離結(jié)果一致。PCR陽性產(chǎn)物測序結(jié)果與各自毒株序列100%同源。表明本試驗(yàn)建立的三重RT-PCR檢測鑒別雞NDV、H9亞型AIV和APV方法具有特異、敏感、快速的特點(diǎn),可用于臨床快速、準(zhǔn)確的鑒別檢測。
[Abstract]:Three pairs of specific primers were designed to detect NDV , H9 subtype avian influenza virus ( NDV ) and avian pneumonia virus ( APV ) by RT - PCR .
【作者單位】: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西動物疫病病原生物學(xué)與診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家“萬人計(jì)劃”領(lǐng)軍人才專項(xiàng)(2016-37) 廣西科技廳重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(桂科AB16380054)和人才專項(xiàng)(桂科AD1638009) 南寧市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)項(xiàng)目(20152308)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 雞新城疫病毒(NDV)、H9亞型禽流感病毒(AIV H9)和禽肺炎病毒(Avian pneumovirus,APV)是危害養(yǎng)雞業(yè)的3種主要病毒,引起的臨床癥狀相似。H9亞型AIV屬正黏病毒科流感病毒屬中的A型流感病毒,病毒基因組為分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA,包含HA、NA、M、PB1、PB2、NP、PA、NS 8個基因組[1]。N
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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