本文關(guān)鍵詞： 豬肺炎支原體 豬鼻支原體 雙重?zé)晒舛縋CR　出處：《畜牧獸醫(yī)學(xué)報》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：建立同時檢測豬肺炎支原體和豬鼻支原體的雙重?zé)晒舛縋CR方法。根據(jù)豬肺炎支原體P97序列和豬鼻支原體P37序列的特異性引物,分別標(biāo)記FAM和Texas Red熒光報告基團(tuán)的2條TaqMan探針,建立和優(yōu)化雙重實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng)條件和體系,同時檢測其敏感性、特異性和重復(fù)性。建立的雙重?zé)晒舛縋CR對豬肺炎支原體和豬鼻支原體的最低檢測值均為10copies·μL-1;與豬源致病菌、病毒和其他常見細(xì)菌均無交叉反應(yīng);各濃度標(biāo)準(zhǔn)品的Ct值變異系數(shù)小于5%,重復(fù)性好。檢測72份臨床樣本,其中豬肺炎支原體的肺陽性率為80%,鼻拭子陽性率22%,支氣管肺泡灌洗液陽性率58.33%;豬鼻支原體的肺陽性率為40%,鼻拭子陽性率66%,支氣管肺泡灌洗液陽性率41.67%。建立的雙重?zé)晒舛縋CR方法比普通PCR更加敏感,實(shí)用性強(qiáng),可用于臨床樣品的檢測。該方法能同時快速和定量地檢測豬肺炎支原體和豬鼻支原體,在短時間內(nèi)獲得樣品的多個信息,快速地解決了多次檢測所需的時間以及經(jīng)濟(jì)消耗,為豬肺炎支原體和豬鼻支原體的監(jiān)測和防控提供了新型、可靠的檢測技術(shù)。
[Abstract]:A dual fluorescent quantitative PCR method was established for the simultaneous detection of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma suis. The specific primers of P97 sequence and P37 sequence of Mycoplasma suis were used. Two TaqMan probes were labeled with FAM and Texas Red, respectively, to establish and optimize the double real-time fluorescence quantitative PCR reaction conditions and systems, and to detect their sensitivity. Specificity and repeatability. The minimum detection value of double fluorescence quantitative PCR for Mycoplasma suis and Mycoplasma suis was 10 copies 路渭 L -1; There was no cross reaction with porcine pathogenic bacteria, viruses and other common bacteria. The coefficient of variation of Ct value of each concentration standard was less than 5 and the reproducibility was good. Among 72 clinical samples, the positive rate of mycoplasma pneumoniae in lung was 80 and the positive rate of nasal swab was 22%. The positive rate of bronchoalveolar lavage fluid was 58.33; The lung positive rate of Mycoplasma suis was 40%, the positive rate of nasal swab was 66g and the positive rate of bronchoalveolar lavage fluid was 41.67.The established double fluorescent quantitative PCR method was more sensitive than that of ordinary PCR. This method can be used to detect mycoplasma pneumoniae and mycoplasma suis rapidly and quantitatively at the same time and obtain multiple information of the sample in a short time. It can quickly solve the time and economic consumption of multiple detection, and provide a new and reliable detection technology for the surveillance and control of Mycoplasma pneumoniae and Mycoplasma suis.
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所 農(nóng)業(yè)部獸用生物制品工程技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗室 國家獸用生物制品工程技術(shù)研究中心;省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗室培育基地-江蘇省食品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗室;
【基金】：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項目[CX(14)2040] 肉類生產(chǎn)與加工質(zhì)量安全控制協(xié)同創(chuàng)新中心
【分類號】：S858.28
【正文快照】： 豬支原體肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine)的主要病原是豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae,M.hyopneumoniae),是一種慢性、高傳染性、可接觸性的動物呼吸道疾病[1-2],發(fā)病率高、死亡率低,在世界各地的豬場廣泛流行和傳播[3-6],引起的豬呼吸道疾病綜合征(porcine res

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1468788