本文關鍵詞： 鴨疫里默氏菌 大腸桿菌 環(huán)介導間接PCR　出處：《中國預防獸醫(yī)學報》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立同時檢測鴨疫里默氏菌和大腸桿菌的環(huán)介導間接PCR方法,本研究根據(jù)鴨疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大腸桿菌的gapA基因的保守序列設計兩對特異性探針,分別標記于豬線粒體基因片段的兩端形成兩種不同的捕獲探針,將捕獲探針與待檢測菌的基因組雜交、補平缺口、環(huán)化后,采用1對引物反向擴增捕獲探針,建立檢測鴨疫里默氏菌和大腸桿菌的環(huán)介導間接PCR方法,擴增片段分別為540 bp和328 bp,本研究建立的方法對金黃色葡萄球菌、禽多殺性巴氏桿菌、沙門氏菌的檢測結果為陰性;能夠檢測出10 pg的鴨疫里默氏菌和大腸桿菌的基因組DNA,與常規(guī)PCR的符合率為100%。本研究建立的環(huán)介導間接PCR方法是一種特異性好、靈敏度高的快速病原學診斷方法,為同時檢測鴨疫里默氏菌和大腸桿菌提供了一種可行的方法。
[Abstract]:To establish an indirect cycle-mediated PCR method for simultaneous detection of Riemer's disease and Escherichia coli in ducks. In this study, two pairs of specific probes were designed according to the conserved sequences of the outer membrane protein A gene of Riemer's disease and the gapA gene of Escherichia coli. Two different kinds of capture probes were formed at the two ends of pig mitochondrial gene fragments respectively. The catch probe was hybridized with the genome of the bacteria to be detected. After cyclization, a pair of primers were used to reverse amplify the capture probe. An indirect PCR method was established for detection of Riemer's disease and Escherichia coli. The amplified fragments were 540bp and 328bprespectively. The method was developed for the detection of Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus). The detection results of Pasteurella multocida and Salmonella were negative. The genomic DNAs of 10 PG of Riemer's disease and Escherichia coli could be detected, and the coincidence rate with conventional PCR was 100. The indirect PCR method established in this study was a good specificity. The rapid etiological diagnosis method with high sensitivity provides a feasible method for simultaneous detection of Riemer's disease and Escherichia coli.
【作者單位】： 福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所福建省畜禽疫病防治工程技術研究中心/福建省禽病防治重點實驗室;
【基金】：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金(CARS-42) 福建省屬公益類項目(2015R1023-2) 福建省畜禽疫病防控技術重大研發(fā)平臺(2014N2003)
【分類號】：S852.61
【正文快照】： 鴨疫里默氏菌病和大腸桿菌病是鴨、鵝臨床上出入境檢驗檢疫局鄭騰研究員惠贈;金黃色葡萄球最常見的疾病,兩種病原的耐藥特點不同,治療時菌261111株購自中國藥品生物制品所;多殺性巴氏選擇的用藥方案也不相同,但臨床上僅憑病變特點桿菌CVCC44801株購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;腸炎

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本文編號：1462299