本文關(guān)鍵詞： 綿羊肺炎支原體 流行病學(xué)調(diào)查 生物學(xué)特性 分離鑒定 藥物敏感性　出處：《石河子大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：綿羊支原體肺炎又名綿羊傳染性胸膜肺炎(Contagious ovipne pleuropneumonia),是由綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)引起的一種以發(fā)熱、呼吸困難、咳嗽、流涕、漸進(jìn)性消瘦及間質(zhì)增生性肺炎為特征的慢性呼吸道疾病。該病主要在以養(yǎng)羊業(yè)為主的國家和地區(qū)流行,1982年我國首次在四川分離出MO,隨后在內(nèi)蒙古、新疆、青海、西藏等地均有該病的流行,給畜牧業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失,成為嚴(yán)重威脅我國養(yǎng)羊業(yè)快速發(fā)展的重要病原之一。新疆是我國畜牧業(yè)大省,綿羊養(yǎng)殖業(yè)在新疆畜牧業(yè)中占有重要的地位,而綿羊支原體肺炎的病例時有發(fā)生。因此,開展綿羊支原體肺炎的流行病學(xué)調(diào)查,分析當(dāng)?shù)亓餍兄甑纳飳W(xué)特性,對該病的科學(xué)防控具有重要的意義。為了了解新疆沙灣縣綿羊支原體肺炎病的感染和流行情況,本研究主要開展了新疆沙灣縣綿羊支原體肺炎的流行病學(xué)調(diào)查,對MO流行株進(jìn)行了分離鑒定及遺傳變異分析,并開展了流行株部分生物學(xué)特性及藥物敏感性研究。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1、新疆沙灣縣綿羊支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查通過血清學(xué)、病原學(xué)、現(xiàn)場及病理解剖等流行病學(xué)調(diào)查方法對沙灣縣7個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的18個羊場共27群綿羊進(jìn)行綿羊肺炎支原體感染和流行調(diào)查。血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,沙灣縣7個鄉(xiāng)鎮(zhèn)綿羊肺炎支原體感染率在7.14-20.00%之間,平均感染率達(dá)11.92%;臨床癥狀疑似病羊鼻拭子PCR檢測結(jié)果顯示,陽性率在58.33-77.78%之間,平均陽性率為66.27%,且不同品種的綿羊感染率存在較大差異,其中湖羊感染率可達(dá)85.71%,明顯高于小尾寒羊(57.14%)和阿勒泰羊(48.15%)。發(fā)病季節(jié)集中在春季和冬季;綿羊發(fā)病年齡主要集中在0-3月齡,其臨床疑似綿羊支原體肺炎所占比例可達(dá)68.57%。感染病羊主要表現(xiàn)為咳嗽、流鼻涕等呼吸道癥狀;病理剖檢病死羊肺部呈肺炎病變,部分呈“肉變”樣。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果證實,新疆沙灣縣7個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均存在不同程度的MO感染,其中博爾通古鄉(xiāng)的感染最為嚴(yán)重。2、綿羊肺炎支原體沙灣流行株的分離鑒定及其遺傳變異分析利用改良KM2培養(yǎng)基對疑似綿羊肺炎支原體感染的病死羊肺臟進(jìn)行病原的分離鑒定,并通過分子生物學(xué)的方法對流行株的16S rRNA和P80抗原基因進(jìn)行序列比對與遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果成功分離出具有MO菌落典型特征的3個菌株。3個流行株16S rRNA基因序列與MO SC01株核苷酸同源性高達(dá)99.35-99.68%;遺傳進(jìn)化樹顯示該流行株與MO SC01株的親緣關(guān)系最近,證實分離的菌株為MO。流行株P(guān)80抗原基因序列與GenBank中已知的MO法國14811株膜蛋白P80基因序列相比,核苷酸同源性為97.11%,推導(dǎo)氨基酸序列的同源性達(dá)98.28%。與MO法國14811株相比,該基因存在60處堿基差異,其中24處是同義突變,36處為錯義突變,導(dǎo)致12個氨基酸發(fā)生了改變,表明MO沙灣流行株與其他地域流行株存在一定的遺傳變異。3、綿羊肺炎支原體流行株部分生物學(xué)特性及藥物敏感性研究通過生化反應(yīng)、生物膜觀察及藥物敏感性測定等對分離出的3個MO流行株進(jìn)行了部分生物學(xué)特性的研究。結(jié)果顯示3個MO流行株可發(fā)酵葡萄糖,并可被美蘭著色;3個流行株在培養(yǎng)60h后染色均可產(chǎn)生稀疏的生物膜,但不能形成明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。通過16種藥物進(jìn)行敏感性測定結(jié)果表明,3株均對鹽酸環(huán)丙沙星、氧氟沙星和阿奇霉素高度敏感,MIC分別為0.013-0.026、0.0195-0.026、0.016-0.026μg/mL;對氟苯尼考、恩諾沙星、莫西沙星鹽酸鹽、鹽酸四環(huán)素、鹽酸林可霉素、克拉霉素中度敏感,MIC分別為0.104-0.208、0.065-0.130、0.104-0.156、0.065-0.104、0.365-0.417、0.417-0.521μg/mL;對鹽酸土霉素、鹽酸強(qiáng)力霉素、紅霉素、米諾環(huán)素、慶大霉素低度敏感,MIC分別為1.042-1.667、0.833-1.458、1.042-1.667、1.25-2.083、2.083-3.3331μg/m L;卡那霉素不敏感;SW-3株對泰樂菌素低度敏感(MIC為1.458μg/mL),其余2株高度敏感(MIC均為0.046μg/m L)。將泰樂菌素低敏株與高敏株進(jìn)行23S rRNA基因突變相關(guān)性分析,泰樂菌素低敏株與高敏株相比,23S rRNA基因20個位點存在差異,其中第559位由T-C,753位G-A,1084位T-C,1358位A-G,1381位A-G,1645位T-C,1652位C-T,1653位T-C,1689位C-T,1695位A-C,1696位T-A,1697位A-G,1761位T-C,1817位T-C,1914位T-C,2123位G-A,2628位G-A,2629位T-C,2789位G-T,2830位C-T等堿基發(fā)生改變,推測這些位點的差異可能與不同流行株對泰樂菌素敏感性差異相關(guān)。本研究開展了沙灣縣綿羊支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查,同時對沙灣流行株16S rRNA基因與P80抗原基因進(jìn)行了遺傳進(jìn)化分析,并對分離株部分生物學(xué)特性進(jìn)行了研究,為沙灣縣該病的有效防控提供了流行病學(xué)資料。
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【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S858.26

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1460227