熱應(yīng)激誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞凋亡及其對HSP70基因表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-01-20 16:48
本文關(guān)鍵詞: 乳腺上皮細(xì)胞 熱應(yīng)激 細(xì)胞凋亡 HSP基因 出處:《河南農(nóng)業(yè)科學(xué)》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為探討熱應(yīng)激對乳腺上皮細(xì)胞凋亡的影響,以體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞為模型,取對數(shù)生長期的乳腺上皮細(xì)胞分別置于39℃和41℃熱處理1 h(以37℃正常培養(yǎng)的細(xì)胞為對照),在37℃恢復(fù)培養(yǎng)0、6、12 h后收集細(xì)胞,采用MTT法檢測細(xì)胞生長抑制率,Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡,比色法分析Caspase-3活性,熒光定量PCR檢測HSP70基因的表達(dá)水平。結(jié)果表明,39℃熱應(yīng)激組細(xì)胞生長抑制率和死亡率高峰期均發(fā)生在熱修復(fù)6 h,細(xì)胞死亡率為15.42%,而41℃熱應(yīng)激組發(fā)生在熱修復(fù)12 h,細(xì)胞死亡率高達(dá)23.18%;高溫處理后,Caspase-3活性呈上升趨勢;39℃熱應(yīng)激組在熱恢復(fù)6 h,HSP70基因表達(dá)量顯著高于對照組,41℃熱應(yīng)激組在熱恢復(fù)0、6、12 h,HSP70基因的表達(dá)量分別為對照組的3.53倍、5.61倍和2.93倍。綜上可知,高溫應(yīng)激激活了Caspase-3活性,從而誘導(dǎo)乳腺上皮細(xì)胞凋亡,并隨高溫強(qiáng)度的增加而作用增強(qiáng),同時(shí)高溫誘導(dǎo)了HSP70基因過表達(dá),協(xié)助細(xì)胞獲得熱耐受性。
[Abstract]:In order to investigate the effect of heat stress on the apoptosis of mammary epithelial cells in vitro, dairy cow mammary epithelial cells were used as the model. Mammary epithelial cells in logarithmic growth period were treated at 39 鈩,
本文編號:1448939
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