本文關(guān)鍵詞： 氟中毒 鈣 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 骨質(zhì)損傷 大鼠　出處：《山西農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：[目的]本研究旨在探討外源性鈣對氟致骨質(zhì)損傷以及成骨細胞凋亡過程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引發(fā)相關(guān)蛋白和基因表達水平的影響,揭示外源性鈣對氟中毒緩解作用的機制,為防止氟中毒盲目補鈣提供理論依據(jù)。[方法]160只SD雄性大鼠隨機分為五組。每組進行如下處理：空白對照組(C)飼喂普通飼料飲用蒸餾水,染氟組(F)飼喂普通飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補低鈣組(F+Ca Ⅰ)飼喂含0.5%CAC03飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補中鈣組(F+CaⅡ)飼喂含1%CaC03飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補高鈣組(F+CaⅢ)飼喂含2%CaCO3飼料飲用氟化鈉水(150mg/L)。試驗周期為30天、60天、90天、120天,不同時間段處理后,采集血清、股骨等組織,進行相關(guān)的骨代謝激素、骨氟含量、生物力學以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因和蛋白測定,包括使用氟離子選擇電極測量骨氟含量,放射免疫法測量血清中生殖相關(guān)激素的含量,透射電子顯微鏡觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。real-time PCR 和 Westernblotting技術(shù)檢測成骨細胞凋亡過程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因mRNA和蛋白的表達水平。[結(jié)果]1.各組氟含量隨著實驗時間的增加氟含量也相應(yīng)的增加。2.血清中骨代謝相關(guān)激素測定結(jié)果：高氟引起甲狀旁腺激素、血清骨鈣素水平顯著升高,引起血清降鈣素水平降低,而補充1%CaCO3可以使甲狀旁腺激素和血清骨鈣素水平降低趨近于對照組水平,使血清降鈣素水平顯著升高和對照組水平相近。3.通過骨生物力學的材料性能指標和結(jié)構(gòu)力學指標可以看出高氟對骨質(zhì)的損傷明顯,補中劑量的鈣可以對骨質(zhì)損傷有很好的緩解作用,而補低劑量和高劑量的鈣均對骨質(zhì)損傷無效果。4.透射電鏡下觀察120日齡骨細胞超微結(jié)構(gòu)變化,空白對照組可見細胞器完整結(jié)構(gòu)清晰,線粒體豐富,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達；染氟組可見細胞內(nèi)大量細胞器丟失溶解,線粒體基質(zhì)變淡,線粒體消失或空泡變性,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)顆粒脫落,解聚；補1%CaC03使成骨細胞內(nèi)細胞器較為完整,線粒體豐富,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕微擴張,少量顆粒脫落。對氟中毒引起的損傷有顯著的減輕。5.在mRNA水平測定和蛋白表達觀察到氟對成骨細胞凋亡過程中與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表達顯著升高,而補1%CaCO3對氟中毒致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因和蛋白水平有顯著降低。[結(jié)論]研究結(jié)果顯示,在宏觀水平上通過骨生物力學和透射電鏡觀察可以看出高氟引起骨質(zhì)損傷,微觀水平上通過對mRNA水平和蛋白表達的測定可以知道高氟使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表達升高;補充1%CaC03對氟中毒大鼠的骨質(zhì)損傷和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有緩解作用,減輕氟對大鼠骨質(zhì)的損傷。
[Abstract]:[Objective] to investigate the effects of exogenous calcium on the expression of related proteins and genes induced by endoplasmic reticulum stress during fluorine-induced bone injury and osteoblast apoptosis. To reveal the mechanism of exogenous calcium in relieving fluorosis and to provide theoretical basis for preventing blind calcium supplement from fluorosis. [Methods: 160 Sprague-Dawley male rats were randomly divided into five groups. Each group was treated as follows: the blank control group (C) was fed with common feed for drinking distilled water. Fluorine group (F) was fed with sodium fluoride water (150 mg / L) and low calcium group (F Ca 鈪，

本文編號：1445511