本文關(guān)鍵詞： 氟中毒 鈣 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 骨質(zhì)損傷 大鼠　出處：《山西農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]本研究旨在探討外源性鈣對(duì)氟致骨質(zhì)損傷以及成骨細(xì)胞凋亡過(guò)程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引發(fā)相關(guān)蛋白和基因表達(dá)水平的影響,揭示外源性鈣對(duì)氟中毒緩解作用的機(jī)制,為防止氟中毒盲目補(bǔ)鈣提供理論依據(jù)。[方法]160只SD雄性大鼠隨機(jī)分為五組。每組進(jìn)行如下處理：空白對(duì)照組(C)飼喂普通飼料飲用蒸餾水,染氟組(F)飼喂普通飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補(bǔ)低鈣組(F+Ca Ⅰ)飼喂含0.5%CAC03飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補(bǔ)中鈣組(F+CaⅡ)飼喂含1%CaC03飼料飲用氟化鈉水(150mg/L),染氟補(bǔ)高鈣組(F+CaⅢ)飼喂含2%CaCO3飼料飲用氟化鈉水(150mg/L)。試驗(yàn)周期為30天、60天、90天、120天,不同時(shí)間段處理后,采集血清、股骨等組織,進(jìn)行相關(guān)的骨代謝激素、骨氟含量、生物力學(xué)以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因和蛋白測(cè)定,包括使用氟離子選擇電極測(cè)量骨氟含量,放射免疫法測(cè)量血清中生殖相關(guān)激素的含量,透射電子顯微鏡觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。real-time PCR 和 Westernblotting技術(shù)檢測(cè)成骨細(xì)胞凋亡過(guò)程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平。[結(jié)果]1.各組氟含量隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的增加氟含量也相應(yīng)的增加。2.血清中骨代謝相關(guān)激素測(cè)定結(jié)果：高氟引起甲狀旁腺激素、血清骨鈣素水平顯著升高,引起血清降鈣素水平降低,而補(bǔ)充1%CaCO3可以使甲狀旁腺激素和血清骨鈣素水平降低趨近于對(duì)照組水平,使血清降鈣素水平顯著升高和對(duì)照組水平相近。3.通過(guò)骨生物力學(xué)的材料性能指標(biāo)和結(jié)構(gòu)力學(xué)指標(biāo)可以看出高氟對(duì)骨質(zhì)的損傷明顯,補(bǔ)中劑量的鈣可以對(duì)骨質(zhì)損傷有很好的緩解作用,而補(bǔ)低劑量和高劑量的鈣均對(duì)骨質(zhì)損傷無(wú)效果。4.透射電鏡下觀察120日齡骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化,空白對(duì)照組可見(jiàn)細(xì)胞器完整結(jié)構(gòu)清晰,線粒體豐富,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)；染氟組可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)大量細(xì)胞器丟失溶解,線粒體基質(zhì)變淡,線粒體消失或空泡變性,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)顆粒脫落,解聚；補(bǔ)1%CaC03使成骨細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器較為完整,線粒體豐富,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕微擴(kuò)張,少量顆粒脫落。對(duì)氟中毒引起的損傷有顯著的減輕。5.在mRNA水平測(cè)定和蛋白表達(dá)觀察到氟對(duì)成骨細(xì)胞凋亡過(guò)程中與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表達(dá)顯著升高,而補(bǔ)1%CaCO3對(duì)氟中毒致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因和蛋白水平有顯著降低。[結(jié)論]研究結(jié)果顯示,在宏觀水平上通過(guò)骨生物力學(xué)和透射電鏡觀察可以看出高氟引起骨質(zhì)損傷,微觀水平上通過(guò)對(duì)mRNA水平和蛋白表達(dá)的測(cè)定可以知道高氟使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的capase-12 和 calapin等基因水平和蛋白表達(dá)升高;補(bǔ)充1%CaC03對(duì)氟中毒大鼠的骨質(zhì)損傷和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有緩解作用,減輕氟對(duì)大鼠骨質(zhì)的損傷。
[Abstract]:[Objective] to investigate the effects of exogenous calcium on the expression of related proteins and genes induced by endoplasmic reticulum stress during fluorine-induced bone injury and osteoblast apoptosis. To reveal the mechanism of exogenous calcium in relieving fluorosis and to provide theoretical basis for preventing blind calcium supplement from fluorosis. [Methods: 160 Sprague-Dawley male rats were randomly divided into five groups. Each group was treated as follows: the blank control group (C) was fed with common feed for drinking distilled water. Fluorine group (F) was fed with sodium fluoride water (150 mg / L) and low calcium group (F Ca 鈪，

本文編號(hào)：1445511