本文關鍵詞： 綿羊 骨骼肌 特異 表達 miRNA 前體 多態(tài) 及其 分析　出處：《石河子大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：提高綿羊的產肉性能在綿羊養(yǎng)殖業(yè)中具有重要的生產意義。據研究表明,mi RNA在骨骼肌發(fā)育過程中起到重要的調控作用。而mi R-1,mi R-133和mi R-206三種mi RNA在骨骼肌和心肌中特異表達,與肌肉發(fā)育息息相關。鑒于此,本論文以mi R-1,mi R-133和mi R-206及其前體為研究對象,從以下幾個方面探究其在綿羊骨骼肌發(fā)育中的表達規(guī)律及生物學作用:1.采集發(fā)育時間為45天、65天、85天、105天和125天的綿羊胚胎,提取后肢骨骼肌樣品并提取RNA,利用熒光定量PCR技術研究mi R-1,mi R-133和mi R-206在綿羊胚胎階段的不同時期以及成年后的表達規(guī)律。2.采用PCR-SSCP及測序檢測mi R-1,mi R-133和mi R-206前體序列在不同產肉性能的四個綿羊品種(特克賽爾羊、阿勒泰羊、中國美利奴羊和湖羊)中的多態(tài)性,發(fā)現(xiàn)m i R-133前體g.54047535位點存在一個AG突變,該位點存在AA、AG、GG三種基因型。并對該突變位點在不同品種綿羊群體中的基因頻率進行生物統(tǒng)計學分析,證明該位點G等位基因頻率在特克賽爾羊群體中遠高于A等位基因,其差異顯著(p0.5)。二級結構預測分析表明該突變可以提高mi R-133前體基因二級結構的穩(wěn)定性。3.將包含該突變位點的mi R-133前體基因序列構建表達載體,轉入Hela細胞,在細胞水平驗證其前體序列的改變對mi RNA成熟加工的影響。實驗證明包含GG基因型的基因片段能夠顯著提高細胞內mi R-133的表達量。本論文的研究成果可在分子水平初步闡明mi R-1,mi R-133和mi R-206的表達量及其前體序列的改變與綿羊骨骼肌生長發(fā)育的相關性,為綿羊骨骼肌生長發(fā)育的調控及優(yōu)良肉羊品種的培育提供理論基礎及手段,對提高綿羊的產肉性能和肉羊育種產生積極地推動作用。
[Abstract]:The expression of mi R - 1 , mi R - 133 and mi R - 206 in sheep ' s skeletal muscle was studied by means of PCR - SSCP and sequencing .

【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S826

【參考文獻】

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本文編號：1445155