發(fā)布時間：2017-12-31 04:39

  本文關(guān)鍵詞：豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌LAMP方法的建立　出處：《中國獸醫(yī)學(xué)報》2016年02期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：為建立快速檢測豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)的鑒別方法,本研究根據(jù)APP ApxIVA基因的保守區(qū)設(shè)計(jì)6條環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(LAMP)引物,利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c實(shí)時濁度儀對反應(yīng)體系和條件進(jìn)行優(yōu)化,建立了APP的LAMP方法。結(jié)果顯示:該方法在64℃下反應(yīng)15min DNA即可出現(xiàn)擴(kuò)增,擴(kuò)增后2~3min內(nèi)即可判定結(jié)果,最低檢測限為0.307ng/L,具有良好的重復(fù)性及穩(wěn)定性,與其他病原菌無交叉反應(yīng),同時,試驗(yàn)結(jié)果可實(shí)現(xiàn)肉眼可視化觀察。采用建立的LAMP方法與SN/T 1447-2011標(biāo)準(zhǔn)公布的方法同時對36份臨床疑似APP樣品進(jìn)行檢測分析,結(jié)果顯示:APP陽性10份,陰性26份,兩種方法的符合率為100%。本研究建立的方法為防止豬傳染性胸膜肺炎的傳播提供了有效的檢測手段。
[Abstract]:In order to establish a method for rapid detection of Actinobacillus pleuropneumoniae ( APP ) , 6 loop - mediated isothermal amplification ( LAMP ) primers were designed according to the conserved region of APP - Apxva gene , and the LAMP method of APP was established .

【作者單位】： 西南大學(xué)動物科技學(xué)院;重慶出入境檢驗(yàn)檢疫局/重慶市進(jìn)出口食品安全工程中心;重慶大學(xué)生物工程學(xué)院;
【基金】：質(zhì)檢公益性資助項(xiàng)目(201310093) 國家質(zhì)檢總局科技資助項(xiàng)目(2014IK247;2013IK049)
【分類號】：S858.28
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:nie1626@163.com;liuli@126.com豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)作為豬傳染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)的病原菌,可引起嚴(yán)重的傳染性呼吸道疾病,該病具有高發(fā)病率和致死率,廣泛分布于中

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本文編號：1358187