本文關鍵詞：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒RT-PCR檢測方法的建立及其應用　出處：《東北農(nóng)業(yè)大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：本研究應用現(xiàn)代分子生物技術,以1日齡SPF雛雞為研究對象,利用被網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒感染雛雞的cDNA為模板,選取相對保守的LTR序列,設計并合成出特異性引物,建立了RT-PCR檢測方法,并對該檢測方法進行優(yōu)化。在此基礎上,又結(jié)合生物學檢測技術,對試驗中感染REV的SPF雛雞心臟、脾臟、肝臟、肺臟、腎臟、胸腺和法氏囊進行檢測,同時又對來自東北某省養(yǎng)殖場選取的50份現(xiàn)地臨診血液樣品進行檢測。本實驗旨在建立REV的快速、高效檢測方法,為日后疾病的防治提供重要的科學基礎和依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)成功建立了檢測網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒的RT-PCR方法,該檢測方法能夠有效地擴增出目的片段,可在4個小時內(nèi)完成對樣品的檢測;(2)該檢測方法的最佳優(yōu)化條件為:退火溫度53℃、引物濃度為0.3μmol/L、Mg2濃度為2.5μmol/L;(3)該方法敏感性高,能特異性檢測REV樣品。對樣品的反復多次檢測,檢測結(jié)果高度一致,該方法具有較高的重復性和穩(wěn)定性;(4)應用上述建立的RT-PCR檢測方法,對試驗中感染REV的SPF雛雞的各個主要器官進行檢測,結(jié)果表明SPF雛雞各個主要器官均受到感染。對東北某省50份現(xiàn)地臨診血液樣品進行檢測,結(jié)果顯示,陽性率高達92%。
【學位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65
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本文編號：1335967