As2O3誘導(dǎo)雞肝臟氧化應(yīng)激和對MSRS的影響
本文關(guān)鍵詞:As2O3誘導(dǎo)雞肝臟氧化應(yīng)激和對MSRS的影響 出處:《華南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:砷是一種類金屬元素,在自然界中以無機砷和有機砷廣泛存在于食物、飲水、地殼環(huán)境等中。砷暴露或過量吸收能導(dǎo)致多種疾病和病理損傷。目前氧化應(yīng)激機制作為砷毒性的主要作用機理之一,認為活性氧(ROS)引起的生物大分子氧化損傷在砷毒性中起主要作用。甲硫氨酸亞砜還原酶(Msrs)是生物體內(nèi)重要的氧化還原調(diào)節(jié)器,直接或間接參與氧化蛋白的修復(fù)和活性氧代謝調(diào)節(jié),可能在砷導(dǎo)致的氧化應(yīng)激毒性中起調(diào)控作用。為了探討砷和Msrs之間的關(guān)系,通過建立雞砷中毒的模型,并對相關(guān)的指標進行了檢測。實驗分成四組,每組1日齡雞在第7d分別以0、1、3、9 mg/kg B.W.的劑量經(jīng)口灌注三氧化二砷制劑5周;每天觀察實驗雞的形態(tài)動作,并在第7 d、14 d、21 d、28d、35 d和42 d的體重進行記錄。5周后對雞進行處死,并迅速獲取肝臟清洗干凈并稱重,用肝組織進行丙二醛(MDA)和總超氧化物歧化酶(T-SOD)進行檢測以評估雞肝的氧化應(yīng)激狀態(tài),并檢測肝組織甲硫氨酸亞砜還原酶基因和蛋白的表達。實驗結(jié)果如下:1.通過每周對實驗動物體重變化記錄發(fā)現(xiàn),低(1 mg/kg)、中(3 mg/kg)、高(9mg/kg)三個三氧化二砷攻毒劑量組的平均體重均比空白組小;與此同時,除低劑量組中的肝臟指數(shù)和空白對照組沒有明顯變化外(P0.05),中劑量組和高劑量組的肝臟均比空白對照組重,且差異極顯著(P0.01)。2.試劑盒檢測MDA和T-SOD,在肝臟組織中,MDA均隨著劑量的增大而顯著升高(P0.01),相反T-SOD活力出現(xiàn)明顯下降的趨勢(P0.01)。3.通過使用熒光定量PCR法(Real-time PCR)檢測甲硫氨酸亞砜還原酶A(MsrA)、甲硫氨酸亞砜還原酶B1(MsrB1)和甲硫氨酸亞砜還原酶B3(MsrB3)mRNA表達情況,發(fā)現(xiàn)三者的表達隨三氧化二砷劑量增加而增加(P0.01)。4.蛋白印跡法(Western Blot)法檢測MsrA和MsrB1蛋白表達情況,發(fā)現(xiàn)MsrB1的蛋白含量隨著三氧化二砷的劑量增加而上升(P0.01),但三氧化二砷也會下調(diào)MsrA的蛋白量(P0.01和P0.05)。實驗結(jié)果表明,各劑量組三氧化二砷(1 mg/kg、3 mg/kg、9 mg/kg)可使雞生長遲緩,且中、高劑量組均造成肝臟重量上升;提高甲硫氨酸亞砜還原酶的基因的表達,并對其蛋白表達出現(xiàn)差異變化。由此我們認為三氧化二砷會誘導(dǎo)雞肝臟的氧化應(yīng)激,并影響肝臟甲硫氨酸亞砜還原酶的表達。
【學(xué)位授予單位】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S858.31
【參考文獻】
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,本文編號:1333488
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