發(fā)布時(shí)間：2017-12-20 08:34

  本文關(guān)鍵詞：黃芩與鼠李糖乳桿菌發(fā)酵產(chǎn)物對仔豬大腸桿菌腹瀉治療效果研究　出處：《吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：仔豬大腸桿菌病主要是由腸毒素型大腸桿菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)引起的一種頻發(fā)、急性、死亡率較高的腸道傳染病,對初生仔豬的生長發(fā)育危害極大。隨著豬養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展,該病的發(fā)病率和死亡率也不斷上升,經(jīng)過不斷研究,中藥微生物發(fā)酵成為仔豬大腸桿菌病防治的新路徑,此方法把適宜營養(yǎng)物質(zhì)作為發(fā)酵培養(yǎng)基,通過微生物生長代謝活動增加中藥活性成分的轉(zhuǎn)化,使其原有性能發(fā)生改變、副作用降低、藥效擴(kuò)大。為探究中藥微生物發(fā)酵產(chǎn)物對ETEC腹瀉的防治效果,本研究首先對鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)ATCC53103的培養(yǎng)基及發(fā)酵所需溫度、時(shí)間、接種量等條件進(jìn)行優(yōu)化;其次選取20味中藥,通過最小抑菌濃度和體外抑菌試驗(yàn)的測定,發(fā)現(xiàn)黃芩對ETEC的抑菌作用最明顯;最后將黃芩與鼠李糖乳桿菌ATCC53103進(jìn)行發(fā)酵處理,對其發(fā)酵產(chǎn)物采用體外抑菌試驗(yàn)、多糖含量測定和動物試驗(yàn)進(jìn)行研究,首先建立由ETEC引起仔豬腹瀉的模型,進(jìn)而將30日齡的生長狀況相同、體重相近的同一批仔豬平均分為A、B、C、D、E五組,除E組外每頭仔豬都灌喂5mL的濃度為3.65×1010CFU/mL的K88大腸桿菌菌液,待全部腹瀉后,A、B、C、D、組分別灌喂生理鹽水、發(fā)酵液、恩諾沙星、黃芩液,待喂服藥物后每兩天進(jìn)行一次體重、采食量等指標(biāo)的測量,第7、14天清晨空腹采血檢測免疫指標(biāo),14天后將仔豬全部宰殺取腸斷進(jìn)行病理切片檢測。具體試驗(yàn)結(jié)果如下:(1)通過碳、氮源的改良實(shí)驗(yàn),確定Lactobacillus rhamnosus ATCC53103生長的培養(yǎng)基為:葡萄糖1%,蛋白胨3%,酵母粉2%,CH3COONa 0.5%,C6H17N3O7 0.2%,K2HPO4·3H2O 0.2%,MgSO4·7H2O 0.02%,MnSO4·H2 O 0.05%,吐溫-80 0.1%,可確定在改良培養(yǎng)液中LGG ATCC53103的菌數(shù)可達(dá)到6.8×109cfu/mL;最適發(fā)酵條件為:150mL培養(yǎng)液裝入250mL量程的錐形瓶內(nèi),pH調(diào)制為6,菌接種4%,溫度、轉(zhuǎn)速、時(shí)間分別設(shè)置為37℃、80r/min、24h。中藥篩選實(shí)驗(yàn)中,通過對20味中藥最小抑菌濃度的測定,得出金銀花、黃芩、黃柏、黃連四種抑菌濃度相同且最小,對這四味中藥繼續(xù)進(jìn)行抑菌試驗(yàn)的測定,金銀花抑菌圈:1.803±0.064cm,黃柏抑菌圈:1.640±0.624cm,黃芩抑菌圈:2.057±0.070cm,黃連抑菌圈:1.780±0.036cm,從抑菌結(jié)果得出黃芩的抑菌作用最優(yōu)。(2)黃芩協(xié)同Lactobacillus rhamnosus ATCC53103發(fā)酵條件優(yōu)化及治療ETEC腹瀉效果研究,最優(yōu)發(fā)酵條件設(shè)置為:菌接種4%,中藥含量13%,pH調(diào)制為6,溫度、轉(zhuǎn)速、時(shí)間分別為37°C、80r/min和30h;在動物實(shí)驗(yàn)中,治療前期,日采食量、平均增重在各治療組之間差異不顯著,各組血清中IgA含量差異較大,治療組中IgA含量均高于空白組與對照組,發(fā)酵產(chǎn)物組IgA含量最高且差異及其顯著(P㩳0.01),治療后期時(shí)各組生產(chǎn)性能較前期均有明顯提高,治療組和對照組之間差距明顯(P㩳0.05),各治療組仔豬的血清中IgA含量降低,且差異不顯著;發(fā)酵產(chǎn)物組腹瀉率、糞便計(jì)分、腸病變程度均低于其他治療組;血清抑菌試驗(yàn)結(jié)果:空白組:0.663±0.070cm,恩諾沙星組:1.603±0.064cm,發(fā)酵液組:1.850±0.060cm,黃芩組:1.580±0.036m,發(fā)酵液組抑菌環(huán)均大于空白組和其他對照組且差異顯著(P㩳0.05),由此可見,黃芩與Lactobacillus rhamnosus ATCC53103協(xié)同發(fā)酵產(chǎn)物治療仔豬ETEC性大腸桿菌病效果最佳。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.28

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1311448