本文關(guān)鍵詞：高黏附性兔源乳酸菌篩選及其對哺乳仔兔腸道菌群和黏蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：由于免疫系統(tǒng)和消化系統(tǒng)發(fā)育不完善,斷奶仔兔易感染致病菌,死亡率較高。益生乳酸菌能有效調(diào)節(jié)動物腸道微生態(tài)平衡,提高腸黏蛋白表達(dá),增強(qiáng)黏液屏障功能,對腸道疾病具有一定防治作用,且同源添加效果更優(yōu)。此外,益生菌對宿主黏液層和上皮細(xì)胞的黏附能力是其穩(wěn)定定植的前提。為開發(fā)仔兔用益生乳酸菌活菌制劑,本研究擬從哺乳仔兔腸黏膜分離篩選出高黏附乳酸菌,探究早期添加對斷奶仔兔生產(chǎn)性能、腸道菌群和黏蛋白表達(dá)的影響,為有效防治斷奶仔兔腸道疾病和促進(jìn)生長提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.從5、7、10日齡仔兔小腸黏膜分離得到20株疑似乳酸菌株,與3株兔源干酪乳桿菌(分別命名為L.a1、L.a2、L.a3)共同評價抑菌特性。7株具有明顯抑菌性的菌株經(jīng)16S rRNA基因序列比對分析鑒定為屎腸球菌(分別命名為E.f1、E.f2和E.f3),短乳桿菌(命名為L.b),植物乳桿菌(分別命名為L.p1、L.p2和L.p3)。3株干酪乳桿菌的抑菌活性最高,顯著高于菌株L.p2和L.p3(P0.05),其余菌株抑菌性較弱。2.檢測試驗(yàn)一得到的10株菌對不同pH人工胃液、不同膽鹽濃度的耐受能力,兔小腸黏蛋白的黏附能力、表面疏水性及自聚合能力。菌種間比較結(jié)果顯示,3種乳酸菌對不同pH條件下的人工胃液的耐受性無顯著差異(P0.05),其中植物乳桿菌對0.2%、0.3%濃度膽鹽的耐受能力顯著高于干酪乳桿菌和糞腸球菌(P0.05),屎腸球菌的黏附性和疏水性顯著低于植物乳桿菌和干酪乳桿菌(P0.05);不同菌株間相互比較發(fā)現(xiàn),在pH3.0人工胃液中,L.p1、L.p2、L.p3、L.a2、E.f1和E.f3的耐受性較高(P0.05);L.p1、L.p2在0.3%膽鹽中活菌數(shù)最多(P0.05),L.a2次之。L.p2和L.a2對黏蛋白的黏附率較高,二者間無顯著差異(P0.05),但顯著高于L.b和E.f(P0.05)。L.p2、L.a3、L.a2的表面疏水能力較高,且均顯著高于L.b和E.f(P0.05)。L.p2和L.a2的自聚合能力顯著高于其他菌株(P0.05)。從整體看,各菌株間的疏水性和黏附性之間基本呈現(xiàn)正相關(guān)性。綜合各指標(biāo),L.p2和干酪乳桿菌L.a2黏附性能較高,且耐受pH3.0的人工胃液和0.3%的膽鹽,具有良好的體外益生效果。3.選取高黏附的L.p2和L.a2,探究單獨(dú)灌服及共同灌服對哺乳仔兔生產(chǎn)性能、腸組織形態(tài)、菌群數(shù)量及黏蛋白表達(dá)的影響,以檢驗(yàn)其體內(nèi)益生效果。選取40只5日齡仔兔,均分為4個處理組:對照組(CON)每天口腔灌服生理鹽水;L.p2組和L.a2組分別每天灌服L.p2、L.a2菌液109 CFU/mL;L.p2+L.a2組每天灌服等比例的混合菌液。結(jié)果顯示,混合灌服顯著增加仔兔補(bǔ)飼前(8~13 d)平均日增重(P0.05),斷奶時空腸、回腸絨毛高度及腸腺比(P0.05);單獨(dú)灌服L.p2顯著提高回腸絨毛高度,空腸、回腸MUC1和MUC2基因的表達(dá)(P0.05);單獨(dú)灌服L.a2顯著提高了空腸MUC1的mRNA相對表達(dá)量(P0.05)。各處理組的十二指腸、空腸、回腸杯狀細(xì)胞密度、補(bǔ)飼后日增重、平均日增重及脾臟指數(shù)、蚓突指數(shù)均無顯著變化(P0.05),但空腸、回腸總菌中大腸桿菌的相對比例均顯著降低(P0.05),回腸乳酸桿菌的相對比例顯著增加(P0.05)。綜上所述,給哺乳仔兔灌服高黏附植物乳桿菌(L.p2)能夠顯著提高斷奶時回腸乳酸菌相對比例,減少空腸、回腸大腸桿菌相對比例,促進(jìn)回腸絨毛生長和空腸、回腸黏蛋白MUC1、MUC2的表達(dá)�；诒狙芯拷Y(jié)果,高黏附兔源植物乳桿菌(L.p2)在體內(nèi)外均具有良好的益生菌特性,適合開發(fā)為兔用益生菌。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S829.1

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