應(yīng)用特異性探針?biāo)幬锓治鲭p峰駝CYP2D6酶體外活性
發(fā)布時(shí)間：2017-12-17 07:00
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【摘要】：動(dòng)物CYP酶是代謝藥物、外源性化學(xué)物質(zhì)和內(nèi)源性化合物的超家族酶系,其中CYP2D6亞酶雖然只占動(dòng)物肝CYP酶系的2%,卻承擔(dān)著約20%左右的藥物代謝。作者旨在較為系統(tǒng)地研究雙峰駝CYP2D6酶的體外活性及其對(duì)特異性抑制劑的敏感性。采用差速離心法制備雙峰駝肝微粒體,借助BCA法和CO還原差示光譜法測(cè)定肝微粒體蛋白濃度和CYP總酶含量。并在優(yōu)化肝微粒體孵育體系及建立CYP2D6酶的特異性底物氫溴酸右美沙芬及其活性代謝產(chǎn)物去甲右美沙芬高效液相色譜法的基礎(chǔ)上,研究雙峰駝CYP2D6酶的動(dòng)力學(xué)特征、底物代謝率及特異性抑制劑奎尼丁對(duì)該酶的抑制作用。結(jié)果表明,雙峰駝肝微粒體蛋白濃度、CYP總酶含量均能滿足試驗(yàn)要求。建立的測(cè)定酶底物和產(chǎn)物的HPLC法靈敏度高、穩(wěn)定性好,且各成分分離完全、峰形良好、無干擾。雙峰駝CYP2D6酶的Vmax值為(0.141 6±0.052 7)nmol·(min·mg)-1,Km值為(12.986 0±0.357 2)μmol·L-1。奎尼丁對(duì)雙峰駝CYP2D6酶的半數(shù)抑制濃度IC50為(2.779 0±0.063 9)μmol·L-1。因此,該試驗(yàn)不僅為深入研究雙峰駝CYP2D6酶體外活性成功建立并優(yōu)化了反應(yīng)體系,而且得出了雙峰駝CYP2D6酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)和特異性抑制劑的IC50值,填補(bǔ)了該領(lǐng)域的空白。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疾病臨床診療技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;內(nèi)蒙古駱駝研究院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260623)
【分類號(hào)】：S824
【正文快照】： 雙峰駝是戈壁、荒漠半荒漠草原的特有畜種,不僅曾經(jīng)是我國(guó)北方游牧民族的主要交通工具,而且也是中原與西域友好交往的重要橋梁。對(duì)東西方文化交流、經(jīng)濟(jì)貿(mào)易的發(fā)展功不可沒。然而,隨著現(xiàn)代交通的快速發(fā)展,雙峰駝的這一重要作用逐漸被取代,失去了昔日的重要地位,養(yǎng)殖數(shù)量急劇下，
本文編號(hào)：1299138
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