發(fā)布時(shí)間：2017-12-09 13:26

  本文關(guān)鍵詞：3型鴨甲型肝炎病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速檢測方法的建立

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【摘要】：為建立一種3型鴨甲型肝炎病毒(DHAV-3)的快速檢測方法,本研究針對DHAV-3 VP1基因序列中的8個(gè)不同區(qū)段設(shè)計(jì)了3對特異性引物,并對反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化,通過加入羥基萘酚藍(lán)(HNB)實(shí)現(xiàn)對反應(yīng)結(jié)果的可視化觀察,建立了檢測DHAV-3的逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫核酸擴(kuò)增(RT-LAMP)方法,采用已建立的方法對人工感染雛鴨的血清樣品和病死鴨肝組織樣品提取的核酸進(jìn)行了檢測。結(jié)果顯示,該方法僅對DHAV-3的RNA進(jìn)行擴(kuò)增,而對1型鴨甲型肝炎病毒(DHAV-1)以及鴨常見的病原RNA均無擴(kuò)增反應(yīng);可以檢測出10拷貝/μL的DHAV-3 RNA,其敏感性為RT-PCR的1 000倍;最低能夠檢測到相當(dāng)于1.1個(gè)DELD50的DHAV-3;能夠檢測到人工感染雛鴨血清和病死鴨肝組織中的DHAV-3;上述結(jié)果表明該方法能夠特異、靈敏、快速地檢測DHAV-3,而且使用方便。
【作者單位】： 中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;
【基金】：國家微生物資源平臺(NIMR-5)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 鴨病毒性肝炎是一種以快速傳播為特點(diǎn)的雛鴨急性致死性傳染病[1]。該病的病原為鴨甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV),分為1、2[2]和3[3]3個(gè)基因型[4]。在我國,同時(shí)存在DHAV-1和DHAV-3流行,給養(yǎng)鴨業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。DHAV-1和DHAV-3在血清學(xué)上不能互相交叉中和,

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1270555