本文關(guān)鍵詞：家兔不同發(fā)育階段和組織中內(nèi)參基因的穩(wěn)定性分析

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【摘要】：本研究旨在篩選出新西蘭白兔不同時(shí)期不同器官中表達(dá)最穩(wěn)定的內(nèi)參基因。以胚胎期(E28.5)、幼齡期(10d)和成年期(A)3個(gè)階段的新西蘭白兔的腎、心和肝3種組織作為研究對(duì)象,按照RT-qPCR試驗(yàn)最低要求試驗(yàn)信息量(MIQE)的指導(dǎo),運(yùn)用RT-qPCR和在線內(nèi)參基因穩(wěn)定性評(píng)價(jià)工具RefFinder,比較6個(gè)常用的內(nèi)參基因(GAPDH、HPRT1、18S rRNA、B2 M、Sdha、β-actin)mRNA的表達(dá)穩(wěn)定性。結(jié)果表明,新西蘭白兔的肝和腎組織中的6個(gè)內(nèi)參基因在3個(gè)發(fā)育階段最穩(wěn)定的3個(gè)內(nèi)參基因依次是β-actin、HPRT1、GAPDH,而在心組織中最穩(wěn)定的3個(gè)內(nèi)參基因依次是β-actin、HPRT1、Sdha。在新西蘭白兔胚胎期的3種組織中,最穩(wěn)定的3個(gè)內(nèi)參基因依次是GAPDH、β-actin、HPRT1,而在幼齡期和成年期最穩(wěn)定的3個(gè)內(nèi)參基因依次是HPRT1、GAPDH、β-actin。對(duì)新西蘭白兔的3個(gè)發(fā)育階段和3種組織的內(nèi)參基因穩(wěn)定性結(jié)果分析表明,最穩(wěn)定的3個(gè)內(nèi)參基因依次是β-actin、HPRT1、GAPDH。本研究證實(shí),新西蘭白兔不同的發(fā)育時(shí)期和組織中,最穩(wěn)定的內(nèi)參基因不同。推薦在進(jìn)行新西蘭白兔的相關(guān)試驗(yàn)時(shí),可以選擇上述表達(dá)最穩(wěn)定的至少3個(gè)內(nèi)參基因的幾何平均數(shù)作為標(biāo)準(zhǔn)化相關(guān)RT-qPCR數(shù)據(jù)的指標(biāo),以確保試驗(yàn)組個(gè)體間的差異最小,和小變量的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)分析。
【作者單位】： 西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】：西南民族大學(xué)研究生學(xué)位點(diǎn)建設(shè)項(xiàng)目(2014XWD-S0906)
【分類(lèi)號(hào)】：S829.1
【正文快照】： 實(shí)時(shí)定量PCR基于熒光信號(hào),可以用于定量基因轉(zhuǎn)錄水平的研究,是用來(lái)了解基因表達(dá)量和功能的技術(shù)。它是研究基因差異表達(dá)最常用的技術(shù),具有特異、靈敏、快速和高通量等優(yōu)點(diǎn),在生命科學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用。在某一點(diǎn)cDNA擴(kuò)增產(chǎn)生的可接受熒光信號(hào)會(huì)轉(zhuǎn)化成cycle threshold(Ct),take-

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1269112