本文關鍵詞：家兔不同發(fā)育階段和組織中內參基因的穩(wěn)定性分析

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【摘要】：本研究旨在篩選出新西蘭白兔不同時期不同器官中表達最穩(wěn)定的內參基因。以胚胎期(E28.5)、幼齡期(10d)和成年期(A)3個階段的新西蘭白兔的腎、心和肝3種組織作為研究對象,按照RT-qPCR試驗最低要求試驗信息量(MIQE)的指導,運用RT-qPCR和在線內參基因穩(wěn)定性評價工具RefFinder,比較6個常用的內參基因(GAPDH、HPRT1、18S rRNA、B2 M、Sdha、β-actin)mRNA的表達穩(wěn)定性。結果表明,新西蘭白兔的肝和腎組織中的6個內參基因在3個發(fā)育階段最穩(wěn)定的3個內參基因依次是β-actin、HPRT1、GAPDH,而在心組織中最穩(wěn)定的3個內參基因依次是β-actin、HPRT1、Sdha。在新西蘭白兔胚胎期的3種組織中,最穩(wěn)定的3個內參基因依次是GAPDH、β-actin、HPRT1,而在幼齡期和成年期最穩(wěn)定的3個內參基因依次是HPRT1、GAPDH、β-actin。對新西蘭白兔的3個發(fā)育階段和3種組織的內參基因穩(wěn)定性結果分析表明,最穩(wěn)定的3個內參基因依次是β-actin、HPRT1、GAPDH。本研究證實,新西蘭白兔不同的發(fā)育時期和組織中,最穩(wěn)定的內參基因不同。推薦在進行新西蘭白兔的相關試驗時,可以選擇上述表達最穩(wěn)定的至少3個內參基因的幾何平均數作為標準化相關RT-qPCR數據的指標,以確保試驗組個體間的差異最小,和小變量的準確數據分析。
【作者單位】： 西南民族大學生命科學與技術學院;
【基金】：西南民族大學研究生學位點建設項目(2014XWD-S0906)
【分類號】：S829.1
【正文快照】： 實時定量PCR基于熒光信號,可以用于定量基因轉錄水平的研究,是用來了解基因表達量和功能的技術。它是研究基因差異表達最常用的技術,具有特異、靈敏、快速和高通量等優(yōu)點,在生命科學研究中被廣泛應用。在某一點cDNA擴增產生的可接受熒光信號會轉化成cycle threshold(Ct),take-

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