本文關(guān)鍵詞：bFGF聯(lián)合妥布霉素地塞米松治療大鼠角膜堿燒傷的效果觀察

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【摘要】：角膜損傷是獸醫(yī)臨床常見的眼科疾病之一,該病可造成角膜感染、混濁及新生血管,形成瘢痕,使透明度下降,嚴(yán)重者引起角膜潰瘍,繼而穿孔。若治療不當(dāng),部分疾病還可繼發(fā)前葡萄膜炎、青光眼、白內(nèi)障等。本試驗使用大鼠建立角膜堿燒傷模型,模擬動物角膜損傷的臨床特點,聯(lián)合使用堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、地塞米松(DXM)、妥布霉素(TOB)點眼治療,通過對大鼠角膜缺損、角膜混濁度、新生血管的臨床評分和病理組織學(xué)觀察,評價聯(lián)合用藥對角膜損傷的治療效果,為動物角膜疾病的臨床診斷和治療提供資料。選取健康Wistar大鼠55只,體重200-250g,將直徑4mm的圓形濾紙片用lmol/L NaOH溶液浸濕,置于角膜中央,1min后取走濾紙片,并用無菌生理鹽水洗除角膜表面多余液體,制成大鼠角膜堿燒傷模型。將堿燒傷模型大鼠隨機(jī)分為五組：A組為堿燒傷組(n=20),B組使用bFGF(n=20), TB組為TOB與bFGF聯(lián)合用藥(n=20),TD組為TOB與DXM聯(lián)合用藥(n=20),TDB組為bFGF、TOB與DXM聯(lián)合用藥(n=20)。A組不予用藥；B組點眼治療,3次/日,1滴／次；TB、TD、TDB組每種藥間隔1h點眼1次,3次/日,1滴／次。每組于造模后第1、3、7、14、21和35天用眼壓計測量眼內(nèi)壓,用裂隙燈顯微鏡觀察大鼠角膜水腫、新生血管及上皮修復(fù)的情況并記錄評分。分別在造模后第3、7、14和35天采集大鼠角膜,進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。結(jié)果如下：(1)大鼠角膜堿燒傷后,可見角膜水腫、混濁,透明度下降,但虹膜紋理可見。病理組織學(xué)觀察顯示：損傷區(qū)域的角膜上皮細(xì)胞完全缺失,基質(zhì)層間隙增大,膠原纖維排列紊亂,基質(zhì)層與內(nèi)皮層分離。(2)大鼠角膜混濁度比較：用藥后第1天,TDB組與其他組相比其混濁度最低,且在第1天和3天時顯著低于A組(P0.01)；第7天時,TDB組混濁度極顯著低于A組(P0.01),與TD組相比沒有顯著性差異(P0.05)；第14天時,TDB組均顯著低于A、B組(P0.01)和TB組(P0.05),但與TD組無顯著性差異(P0.05)。(3)大鼠角膜新生血管比較：治療后第1天,各組角膜均無新生血管形成；第3天時,角膜上出現(xiàn)新生血管,TDB組明顯少于A組和B組(P0.01),但與TB組、TD組無顯著性差異(P0.05)；第7天時,TDB組明顯少于A組、B組和TB組(P0.01),但與TD組無顯著性差異；第14天時,TDB組也明顯少于A組、B組和TB組(P0.01),但與TD組無顯著性差異(P0.05)。(4)大鼠角膜缺損率比較：治療后第1天,各組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。第3天時,TDB組角膜缺損率顯著低于A組(P0.01),但與B組、TB組和TD組均無顯著性差異(P0.05)；第7天時,TDB組與其他4組均無顯著性差異(P0.05)；治療第14天,TDB組角膜缺損率顯著低于TD組(P0.01),但與A組、B組和TB組無顯著性差異(P0.05)。(5)大鼠眼內(nèi)壓比較：治療第1天時,TDB組與正常眼壓無顯著性差異(P0.05)；第3、7天時,TDB組高于正常眼壓,但無顯著性差異(P0.05)；第14、21天時,TDB組低于正常眼壓,但無顯著性差異(P0.05)；第35天時,TDB組低于正常眼壓,呈極顯著差異(P0.01)。(6)大鼠角膜病理組織學(xué)觀察顯示：治療第3天時,TDB組角膜上皮細(xì)胞愈合1-2層,細(xì)胞形態(tài)基本完整,上皮層和基質(zhì)層連接處不平整,排列稍許紊亂,但細(xì)胞之間緊密相聯(lián),未見明顯間隙與裂痕,炎性細(xì)胞少；A組上皮細(xì)胞缺失,基質(zhì)細(xì)胞向缺損部位填補(bǔ),損傷邊緣的角膜上皮層水腫,有大泡狀病變,基質(zhì)層間隙增大,排列紊亂,有大量的炎性細(xì)胞浸潤。第7天時,TDB組角膜上皮細(xì)胞愈合2-3層,細(xì)胞形態(tài)趨向完整,上皮層與基質(zhì)層連接處相對平整,基質(zhì)層未見炎性細(xì)胞浸潤；A組上皮層缺失,炎性細(xì)胞分布于膠原纖維間隙,基質(zhì)層上部出現(xiàn)滲出物。第14天時,TDB組上皮增生為5-6層,但在上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)和最外層出現(xiàn)空泡樣變化,細(xì)胞連接不緊密,基質(zhì)層間隙增大,但未見炎性細(xì)胞浸潤和紅細(xì)胞；A組角膜上皮層愈合不均,基質(zhì)層間有大量新生血管和成熟紅細(xì)胞,膠原纖維排列紊亂。第35天時,TDB組角膜上皮的層數(shù)變少,上皮層內(nèi)有空泡樣變化,基質(zhì)層間隙大,膠原纖維排列紊亂,間隙內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤；A組角膜上皮己基本愈合,呈4-5層,角膜基質(zhì)層出現(xiàn)大量炎性細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,間隙有新生血管和成熟紅細(xì)胞。綜上所述,bFGF、DXM和TOB聯(lián)合使用7天可抑制角膜炎性反應(yīng),減輕角膜水腫程度,減少新生血管的形成,促進(jìn)角膜堿燒傷的愈合。
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S857.6

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本文編號：1228733