本文關(guān)鍵詞：促黃體生成素和17β-雌二醇對(duì)牦牛輸卵管糖蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：為研究相關(guān)激素是否通過體細(xì)胞參與哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育的調(diào)控,本研究探討了促黃體生成素(luteinizing hormone,LH)和17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)對(duì)牦牛(Bos grunniens)輸卵管上皮細(xì)胞分泌輸卵管糖蛋白(oviductin,Ovn)的影響。體外培養(yǎng)牦牛輸卵管上皮細(xì)胞,分別添加0、10、25、50、100和200 ng/m L LH和E2,作用72 h后,運(yùn)用q RT-PCR和免疫熒光技術(shù),從基因和蛋白水平檢測Ovn表達(dá)。獲得如下結(jié)果:(1)LH和E2可以提高牦牛輸卵管上皮細(xì)胞的Ovn m RNA相對(duì)表達(dá)量;當(dāng)LH濃度為10 ng/m L時(shí),Ovn m RNA的相對(duì)表達(dá)量最高,顯著高于LH濃度為25、50、100和200 ng/m L組(P0.05),對(duì)照組Ovn m RNA的表達(dá)量最低(P0.05);當(dāng)E2濃度為25 ng/m L時(shí),輸卵管上皮細(xì)胞的Ovn m RNA相對(duì)表達(dá)量最高,顯著高于E2濃度為10、50、100和200 ng/m L組(P0.05),對(duì)照組Ovn m RNA表達(dá)量最低(P0.05)。(2)Ovn主要分布于核膜,細(xì)胞質(zhì)也有表達(dá);LH和E2可以提高輸卵管上皮細(xì)胞的蛋白相對(duì)表達(dá)量,當(dāng)LH濃度為10ng/m L時(shí),Ovn的蛋白表達(dá)量達(dá)到最高,LH濃度達(dá)到25 ng/m L時(shí),Ovn的蛋白表達(dá)量降低;當(dāng)E2濃度為10~25 ng/m L時(shí),Ovn的蛋白表達(dá)量隨著E2濃度的上升不斷增加,在25 ng/m L的E2作用后,Ovn的蛋白表達(dá)量達(dá)到最高,E2濃度達(dá)到50 ng/m L時(shí),Ovn的蛋白表達(dá)量降低。上述結(jié)果表明,LH和E2對(duì)牦牛輸卵管上皮細(xì)胞分泌Ovn具有明顯的促進(jìn)作用,LH的最佳作用濃度為10 ng/m L,E2的最佳作用濃度為25ng/m L。本研究為揭示LH和E2對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞分泌Ovn的作用機(jī)制提供了基礎(chǔ)資料,為進(jìn)一步研究相關(guān)激素對(duì)牦牛胚胎發(fā)育的調(diào)控提供了一定理論依據(jù)。
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院/甘肅省牛羊胚胎工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.31272616和No.31472244)
【分類號(hào)】：S823.85
【正文快照】： 哺乳動(dòng)物的輸卵管作為一個(gè)高度活躍的分泌器官,其管腔中液體主要由輸卵管上皮細(xì)胞分泌,或?yàn)檠逯羞x擇性濾過液體,兩者的組合稱為輸卵管液,該液體作為體內(nèi)早期胚胎發(fā)育的最主要環(huán)境,為胚胎發(fā)育提供合適的環(huán)境(Leese,1988)。輸卵管上皮細(xì)胞作為輸卵管重要組成元素,可分泌多種蛋

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