發(fā)布時(shí)間：2017-11-11 18:20

  本文關(guān)鍵詞：豬諾如病毒巢式RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用

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【摘要】：為了解中國豬群中豬諾如病毒感染情況,本研究根據(jù)豬諾如病毒保守的RNA依賴性RNA多聚酶(RNA Dependent RNA Polymerase,RDRP)基因序列設(shè)計(jì)了一套巢式RT-PCR引物,用該引物從豬糞便樣品中擴(kuò)增出與預(yù)期目的產(chǎn)物大小一致的條帶,經(jīng)克隆、測序后獲得的序列與GenB ank數(shù)據(jù)庫序列比對,證明所擴(kuò)增的序列屬于豬諾如病毒,表明本研究成功建立了豬諾如病毒巢式RT-PCR檢測方法。該檢測方法具有高特異性和敏感性,應(yīng)用該方法檢測某豬場健康育肥豬糞便樣品,陽性率為54.5%。通過RDRP基因進(jìn)行核苷酸同源比對發(fā)現(xiàn)本文獲得的豬諾如病毒W(wǎng)uning 1株屬于GII群諾如病毒,與美國豬諾如病毒毒株OH-QW101/03/US、中國豬諾如病毒毒株Norovirus pig/GII/Ch6/China/2009核苷酸序列同源性最近。值得注意的是豬諾如病毒W(wǎng)uning1毒株與武漢人諾如病毒毒株E2120/CHN/2010核苷酸同源性高達(dá)77.1%,說明豬諾如病毒W(wǎng)uning 1毒株與武漢人諾如病毒基因組上親緣性較近。本研究成功建立了一種檢測豬諾如病毒的巢式RT-PCR方法,并應(yīng)用于臨床豬糞便樣品的檢測,為豬諾如病毒的診斷與監(jiān)測提供了可供借鑒的方法、為豬諾如病毒的進(jìn)化、分子病毒學(xué)及與人諾如病毒關(guān)系的深入研究提供依據(jù)。
【作者單位】： 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260611,31372457) 江西省研究生創(chuàng)新專項(xiàng)資金項(xiàng)目(YC2014-S181) 江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2013BAB204017) 江西省落地計(jì)劃(2013BAB204017)~~
【分類號】：S852.651
【正文快照】： 諾如病毒(Norovirus)是杯狀病毒科,諾如病毒屬的成員,現(xiàn)已成為發(fā)展中與發(fā)達(dá)國家非細(xì)菌性腹瀉的重要致病原之一[1]。該病毒最初在美國俄亥俄州諾瓦克市暴發(fā)的一起幼兒患者急性腹瀉的糞便中檢出。1972年,Kapikian等[2]首次在電子顯微鏡下觀察到諾如病毒粒子形態(tài)。該病毒直徑約為

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：1172554